목차
1. 대장균(Escherichia coli, E. coli, 에스체리키아 콜라이, 이. 콜라이)
2. 토양 오염의 영향 -"오염된 밥상"
3. 토양오염
4. 대장균군과 대장균
1. 대장균군의 정의
2. 대장균군의 의의
3. 대장균(Escherichia coli)
4. 분원성 대장균(Fecal Coliforms, FC)
5. 상수관리에 있어서 대장균의 기준
6. 우리나라의 대장균군 검출 규정
대장균군 검출방법
2. 토양 오염의 영향 -"오염된 밥상"
3. 토양오염
4. 대장균군과 대장균
1. 대장균군의 정의
2. 대장균군의 의의
3. 대장균(Escherichia coli)
4. 분원성 대장균(Fecal Coliforms, FC)
5. 상수관리에 있어서 대장균의 기준
6. 우리나라의 대장균군 검출 규정
대장균군 검출방법
본문내용
험관을 사용한다. 또 시료를 10㎖로 하는 경우는 2배 농축된 배지를 사용한다. 시료가 접종된 시험관은 35±0.5℃의 dried incubator에서 배양하여 24±2시간 내에 가스가 발생하지 아니하였을 때에는 48±3시간까지 계속 배양하며, 가스가 발생하지 않았을 때는 음성으로 판정하고, 가스발생이 있을 때는 양성으로 판정한다. 양성 시험관은 확정시험을 수행한다. 확정시험(confirm!!ed test)은 추정시험에서 양성으로 의심되는 모든 시험관을 백금이(loop)를 사용하여 BGLB(Brilliant Green Lactose Bile, MERCK)배지와 다람관을 넣은 시험관에 무균적으로 이식하여 35±0.5℃의 dried incubator에서 48±3시간동안 배양한다. 다람관을 통해 가스 발생여부를 관찰하여 가스가 발생하면 확정시험 양성으로 판정한다. 이렇게 하여 양성으로 판정된 시험관에 의한 총대장균군수의 계수는 최적확수표에 의거하여 총대장균군수(MPN)/100㎖의 단위로 표시한다.
2) 분원성 대장균군
본 시험법은 총대장균군 검출방법과는 달리 추정시험과 확정시험, 이렇게 2단계로 구분되며, 확정시험까지 분석하여 도출한다. 추정시험은 총대장균군과 동일한 방법으로 하며, 배양 시작 후 48시간 이내에 가스발생이 된 모든 시험관에 대하여 확정시험을 수행한다. 확정시험은 추정시험에서 가스발생이 된 모든 시험관을 백금이를 사용하여, 무균조작으로 EC(MERCK)배지와 다람관을 넣은 시험관에 이식한 후 44.5±0.2℃의 water jacket incubator 에서 24±2시간 배양하여 다람관을 통해 가스가 발생하면 확정시험 양성으로 판정한다. 이렇게 하여 분원성 대장균군의 최적확수는 총대장균군 최적확수표에 의거하여 분원성 대장균군수(MPN)/100㎖의 단위로 표시한다.
(2) 막여과 시험방법
본 시험법은 시료의 종류 및 특성에 따라 적당량의 시료를 취하고, 여과시료가 1㎖이하인 경우에는 멸균 희석수를 사용하여 적당히 희석한 후, 여과막에 여과하여 그 여과막을 배지에 배양시킨다. 선택배지에 따라 형성된 집락(colony)을 계수하여 여과된 시료에 들어있는 특정 미생물만을 선별하여 균수를 얻을 수 있는 방법이다.
1) 총대장균군
멸균된 핀셋으로 0.45㎛의 공극(pore size)을 가진 여과막(cellulose nitrate filter, Sartorius)의 눈금을 위로하여 시료의 상태에 따라 적정량의 시료를 3단계의 십진 희석법으로 처리하여 각 희석단계마다 5개씩(x5 replicate) 여과한다. 여과된 막의 눈금이 있는 면을 위로하여 m-Endo Agar LES(MERCK)배지 위에 올려놓은 다음 페트리접시를 거꾸로 놓고 35±0.5℃의 dried incubator에서 22~24시간 배양시킨다. 총대장균군은 유당을 발효하여 알데히드를 생성하게 되어 붉은색의 금속성 광택을 띠는 집락을 형성하는데, 이 집락을 총대장균군 추정세균으로 간주하고 계수하여 그 결과를 총대장균군수(CFU)/100㎖의 단위로 표시한다.
2) 분원성 대장균군
총대장균군 검출방법과 마찬가지로 여과한 뒤, 여과된 막의 눈금이 있는 면을 위로하여 m-FC Agar(MERCK)배지 위에 올려놓은 다음 페트리접시를 거꾸로 놓고 44.5±0.2℃의 water jacket incubator에서 24±2시간동안 배양시킨다. 분원성 대장균군은 배양 후 여러 가지 색조를 띠는 파란색의 집락을 형성한고, 비분원성 대장균군은 회색이나 크림색을 띤다. 즉, 파란색을 띠는 집락을 분원성 대장균군 추정세균으로 간주하고 계수하여 그 결과를 분원성 대장균군수(CFU)/100㎖의 단위로 표시한다.
2) 분원성 대장균군
본 시험법은 총대장균군 검출방법과는 달리 추정시험과 확정시험, 이렇게 2단계로 구분되며, 확정시험까지 분석하여 도출한다. 추정시험은 총대장균군과 동일한 방법으로 하며, 배양 시작 후 48시간 이내에 가스발생이 된 모든 시험관에 대하여 확정시험을 수행한다. 확정시험은 추정시험에서 가스발생이 된 모든 시험관을 백금이를 사용하여, 무균조작으로 EC(MERCK)배지와 다람관을 넣은 시험관에 이식한 후 44.5±0.2℃의 water jacket incubator 에서 24±2시간 배양하여 다람관을 통해 가스가 발생하면 확정시험 양성으로 판정한다. 이렇게 하여 분원성 대장균군의 최적확수는 총대장균군 최적확수표에 의거하여 분원성 대장균군수(MPN)/100㎖의 단위로 표시한다.
(2) 막여과 시험방법
본 시험법은 시료의 종류 및 특성에 따라 적당량의 시료를 취하고, 여과시료가 1㎖이하인 경우에는 멸균 희석수를 사용하여 적당히 희석한 후, 여과막에 여과하여 그 여과막을 배지에 배양시킨다. 선택배지에 따라 형성된 집락(colony)을 계수하여 여과된 시료에 들어있는 특정 미생물만을 선별하여 균수를 얻을 수 있는 방법이다.
1) 총대장균군
멸균된 핀셋으로 0.45㎛의 공극(pore size)을 가진 여과막(cellulose nitrate filter, Sartorius)의 눈금을 위로하여 시료의 상태에 따라 적정량의 시료를 3단계의 십진 희석법으로 처리하여 각 희석단계마다 5개씩(x5 replicate) 여과한다. 여과된 막의 눈금이 있는 면을 위로하여 m-Endo Agar LES(MERCK)배지 위에 올려놓은 다음 페트리접시를 거꾸로 놓고 35±0.5℃의 dried incubator에서 22~24시간 배양시킨다. 총대장균군은 유당을 발효하여 알데히드를 생성하게 되어 붉은색의 금속성 광택을 띠는 집락을 형성하는데, 이 집락을 총대장균군 추정세균으로 간주하고 계수하여 그 결과를 총대장균군수(CFU)/100㎖의 단위로 표시한다.
2) 분원성 대장균군
총대장균군 검출방법과 마찬가지로 여과한 뒤, 여과된 막의 눈금이 있는 면을 위로하여 m-FC Agar(MERCK)배지 위에 올려놓은 다음 페트리접시를 거꾸로 놓고 44.5±0.2℃의 water jacket incubator에서 24±2시간동안 배양시킨다. 분원성 대장균군은 배양 후 여러 가지 색조를 띠는 파란색의 집락을 형성한고, 비분원성 대장균군은 회색이나 크림색을 띤다. 즉, 파란색을 띠는 집락을 분원성 대장균군 추정세균으로 간주하고 계수하여 그 결과를 분원성 대장균군수(CFU)/100㎖의 단위로 표시한다.
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