식물조직배양 등..

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식물조직배양 등..에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

[cf. 0.7% microagar, 0.8% bacto agar]
..........2,4-DBAP
0
1
10
100
0
1
2
3
4
0.5
5
6
7
8
5
9
10
11
12
50
13
14
15
16
조건당(1-16) 100ml 씩.- 3차 증류수 넣기- MS stock sol. 넣기- Growth regulator stock solution 넣기
e.g. G.R stock sol. 1mM 2,4-D 이용.
0μM 2,4-D


1μM 2,4-D
stock sol. 1ml/1L
1μM

stock sol. 0.1ml/100ml
1μM
10μM 2,4-D
stock sol. 10ml/1L
10μM

stock sol. 1ml/100ml
10μM
100μM 2,4-D
stock sol. 100ml/1L
100μM

stock sol. 10ml/100ml
100μM
e.g. 1mM BAP 도 같은 방법으로 첨가
- 100ml volume- pH5.8[Hcl, KOH]- agar - autoclave- petri dish 분주
미량.대량원소
비타민류
한천(Agar)
pH Adjust
성 분
MS
White
B5
VW
H1
N&N2
KC3
R&M4
(NH4)2SO4
.
.
134
500
.
.
500
400
MgSO4.7H2O
370
720
250
250
.
125
250
400
Na2SO4
.
200
.
.
.
.
.
.
KCl
.
65
.
.
.
.
.
500
CaCl2.2H2O
440
.
150
.
.
.
.
.
KNO3
1900
80
2500
525
.
125
.
.
Ca(NO3)2.4H2O
.
300
.
.
.
500
1000
1000
NH4NO3
1650
.
.
.
.
.
.
.
NaH2PO4.H2O
.
16.5
150
.
.
.
.
.
KH2PO4
170
.
.
150
.
125
250
250
FeSO4.7H2O
27.8
.
.
.
.
27.85
25
.
Na-EDTA
37.3
.
..
..
.
37.25
.
22.4
MnSO4.4H2O
22.3
7
10
7.5
.
25
7.5
7.5
ZnSO4.7H2O
8.6
3
2
.
..
10
.
0.03
CuSO4.5H2O
0.025
.
0.025
..
..
0.025
..
0.001
Fe2(SO4)3
.
2.5
.
..
..
.
.
10.67
CoCl2.6H2O
0.025
.
0.025
.
..
0.025
.
.
구연산
.
.
.
.
..
.
.
150.1
KI
0.83
0.75
0.75
.
.
.
.
.
H3BO3
6.2
1.5
3
.
.
10
.
0.03
Na2MoO4.2H2O
0.25
.
0.25
.
.
0.25
.
.
Fe-EDTA
.
.
40
.
.
.
.
.
Ca3(PO4)2
.
.
..
200
.
.
.
.
주석산철
.
.
..
28
.
.
.
.
하이포넥스
.
.
.
.
3000
.
.
.
Sucrose
30g
2g
20g
20g
20000
20g~30g
20g
.
myo-Inositol
100
.
100
.
.
.
.
.
Nicotin Acid
0.5
0.5
1.0
.
.
.
.
0.5
염산피리독신
0.5
0.1
1.0
.
.
.
.
0.5
염삼 티아민
0.1~1
0.1
10
.
.
.
.
0.1
판토텐산칼슘
.
1
.
.
.
.
.
.
비오틴
.
.
.
.
.
.
.
.
글리신
2
3
..
.
.
.
.
2
염산시스틴
.
1
.
.
.
.
.
.
엽산
.
.
.
.
.
.
.
.
한천
10g
5g
9~10g
16g
8~10g
20g
175g
.
pH
5.7~5.8
5.5
5.5
5.0~5.2
5.0
5.4
5.0~5.2
.



* 1 Kano H Medium, 2 Nitsch &Nitsch Medium, 3 Knudson C Medium, 4 Reinet &Mohr Medium.
주요배지의 Stock제작 (제작배지 : mVW, MS, H)먼저 미량원소, 대량원소 Stock을 만들고, 비타민 Stock을 만들어 놓습니다. [MS Medium Stock Solution 제작방법]=1000ml 기준

Stock.
Constotients
Media (per 1L)
Compound name
Macro Stock.(MS I)Macro nutrients*10
KNO3
19.00g
Potassium nitrate
NH4NO3
16.50g
Ammonium nitrate
KH2PO4
1.70g
P.phospate disbasic anhydrous
MgSO4.7H2O
3.70g
Magnesium sulfate
CaCl2.2H2O
4.40g
Calcium Chloride (dihydrate)
Micro Stock.MSⅡ
Micro nutrients*100
H3BO3
0.620g
Boric acid
MnSO4.4H2O
1.690g
Manganous sulfate
ZnSO4.7H2O
0.860g
Zinc sulfate
KI
0.083g
Postassium iodide
Na2MoO4.2H2O
0.025g
Sodium molybdate
CuSO4.5H2O
0.0025g
Cupric sulfate
CoCl2.6H2O
0.0025g
Cobalt chloride
Stock *1000
Na2-EDTA
7.450g
EDTA : (Disodium ethylene diamine tetra-acetate)
Fe2SO4.7H2O
5.570g
Ferrous sulfate
MS Vitamin Stock
(MSG)
*100make ice cube.
Glycine
0.400g
Nicotinic acid
0.100g
Pyridoxine-HCl (1N)
0.100g
1N. HCl용액에 녹입니다.
Thiamin-HCl (1N)
0.020g
1N. HCl용액에 녹입니다.
☞ 만약 Myo-inositol를 사용하려면 사용할때마다 100mg을 녹여 사용합니다. 절대 Stock에미리 첨가하여 사용하지 마십시요.
최종첨가물및Adjust pH
Sucrose
30g, 20g
재료식물 20g, 조직배양 30g
Agar
0.3-0.8g
phytagel 0.3%, micro agar 0.7%, bacto agar 0.8%
pH
5.7 ~ 5.8

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