6 Catalase & Protease 효소 확인 시험(결과)

소개글

6 Catalase & Protease 효소 확인 시험(결과)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Subject
2. Introduction
3. Principle & Theory
4. Apparatus, Reagents & Procedure
5. Results
6. Consideration
7. Reference
-참고문헌

본문내용

록 기포가 발생하지 않음→ 음성 반응
(2) Protease activity
Protease 활성 반응 실험은 catalase test와 달리 overlay를 통해 세균을 배양하면서 관찰하는 실험이다.
Skim milk medium은 단백질로 인해 황색을 띄게 되는데, 이때 배지에 protease 활성을 지닌 미생물을 배양할 경우 해당 미생물이 단백질을 분해하면서 배지가 투명하게 변하는 것을 통해 실험결과를 관찰할 수 있다.
실험결과는 Bacillus subtilis가 protease를 통한 단백질 분해가 더욱 활성적으로 확인 되었고 Enterococcus faecalis는 protease를 통한 단백질 분해는 있지만 Bacillus subtilis에 비해 활성도가 떨어지는 것으로 확인되었다.
6. Consideration
Cytochrome oxidase나 catalase 활성이 없는 세균들이 혐기성 환경에서만 존재하는 이유
혐기성세균이 산소에 대해 감수성을 갖기 때문이며, 유기호흡을 하는 경우 그 결과로 생긴 과산화수소를 분해하는 카탈라아제를 형성하는 효소가 없기 때문이다. 혐기성세균은 산소를 쓰지 않고 유기물을 분해하여 에너지를 얻는데, 이것이 발효이다.
과산화수소 이외의 독성 산소형태와 제거 가능 효소
(a) peroxidase
H2O2 + NADH + H+ → 2H2O + NAD+
(b) superoxide dismutase
O2- + O2- + 2H+ → H2O2 + O2
(c) superoxide dismutase와 catalase의 공통반응
4O2- + 4H+ → 2H2O + 3O2
(d) superoxide reductase
O2- + 2H+ + rubredoxin reduce → H2O2 + rubredoxin oxidized
이번 실험은 미생물 내 catalase와 protease의 유무를 확인하고 이들 효소가 과산화수소와 단백질을 분해하는 것을 확인하는 실험이다. 과산화수소의 경우 분해가 일어나면 물과 산소로 바뀌며, 이때 발생되는 산소거품(방울)의 확인을 통해 과산화수소가 실제로 분해되었는지를 비교적 간단하게 눈으로 확인할 수가 있다. 실험 결과에 따르면 Bacillus subtilis의 경우에는 산소거품이 즉각적으로 발생해서 강한 양성반응으로 나타났으나 Enterococcus faecalis는 10분이 자나도록 거품이 발생하지 않아 음성으로 나타났다. 실제로 과산화수소는 상처소독에 이용되는 약품이다. 과산화수소수의 소독 작용은 과산화수소수가 혈액 속의 catalase와 반응·분해되면서 물과 산소를 만들고 이때 발생한 활성산소가 상처를 소독하게 되는 것이다.
결과에 따라 Enterococcus faecalis를 확인해보면 음성이므로 혐기성 세균으로 확인이 되고 혐기성이지만 산소가 있는 곳에서도 생장이 가능하므로 통성혐기성균이다. Bacillus subtilis의 경우 catalase를 통해 과산화수소가 분해되어 산소가 발생하므로 호기성균이다.
단백질은 분해 시 대부분 미생물의 질소원으로 작용하게 되며, 세포내 세포질, 핵산 등 다양한 부분의 구성성분이 된다. 이는 미생물의 활성에 가장 기본적이며 필수불가결의 요소로 산소에 관련해서는 혐기성과 호기성으로 분류하지만 단백질에 관해서는 유무에 따른 분류를 하지 않는다.
7. Reference
사이언스올 과학백과사전, 카탈라아제, "np", "2013.05.02",

연세대학교 원주의과대학 원주기독병원 임상병리과, 미생물학 textbook, "np", "2013.05.02"

Hanker JS, Rabin AN(1975), J Clin Microbiol, Color reaction streak test for catalase-positive microorganisms, p.463
위키백과사전, "np", "2013.05.02",

위키백과사전, "np", "2013.05.02",

사이언스올 과학백과사전, '1.고초균~3.대장균'
윤근수, 제약용수의 종류, "2007.08.06", "2013.05.02",

고려에이스과학, CleanBench_Vertical.pdf, "np", "2013.05.02",

고려에이스과학, autoclave, "np", "2013.05.02",

네이버 지식백과, 탈지유, "np", "2013.05.02",

연세대학교 원주의과대학 원주기독병원 임상병리과, 미생물학 textbook, "np", "2013.05.02"

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미생물의약품,   효소,   카탈라아제.프로테아제,   미생물실험