각 식물별 조직배양

목차

1. 카 네 이 션

2. 백 합

3. 거 베 라

4. 숙 근 안 개 초

5. 글 라 디 올 러 스

6. 안 스 리 움

7. 온시디움(1)

8. 온시디움(2)

9. 온 시 디 움 ( 3 )

10. 덴 비 드 리 움

본문내용

복합첨가물
Peptone
Tomato or banana pulp8
1g
50~100 g
No stock
No stock
No stock
No stock
Weigh
Weigh
당
Sucrose
20 g
No stock
No stock
Weigh
증류수
To 100 ml
한천
10~12 g
No stock
No stock
Weigh
5. 배양과정
화경의 선단부 약 2cm정도 마른 잎등을 제거한 후 흐르는 물에서 흙, 먼지를 씻어낸다. 재료 살균 후 무균상에서 화경의 양끝을 잘라 버리고 2~3mm의 두께로 얇게 절편을 만들어 절단면이 배지에 닿게 배양한다.
6. 발달과정
bud의 생육상태에 따라 초대 배양 4~8주 후에 callus와 PLB가 형성된다. 이 PLB를 분리해서 계대배양 한다. 계대배양은 계절, 배지, 배양체의 활력에 따라
다르지만, 대체로 4주 간격으로 한다. 번식 6개월 후면 수천개의 PLB를 얻을 수 있다. 신초와 뿌리는 토마토와 바나나 즙액이 첨가된 배지에서 잘 형성된다.
10. 덴비드리움
1. 정단배양
shoot-tip culture;KIM.KUNISAKI & SAGAWA,1970
1) 배양재료
회전식 진탕기에서 배양하며, 배양실의 온도는 22 로 조절하고 형광등(100lux내외)으로 연속 조명한다.
2) 재료의 살균
5%(v/v)의 Clorox용액에 5~8분간 살균하며 살균절차는 Cymbidium에 준한다.
(그림 2) Dendrobium의 정단 및 액아채취
3) 배양조건
회전식 진탕기에서 배양하며,배양실의 온도는 22 로 조절하고 형광등(100lux내외)으로 연속 조명한다.
4) 배지
vacin & went 배지에 150ml의 코코넛액을 첨가한 고체배지(한천 8g/ )또는 액체배지를 이용한다.
5) 배양방법
Cymbidium과 동일하다.
6) 참고사항
배양 45일 이내에 절편체가 상당히 큰 녹색을 띤 덩어리로 생장하고,3개월 후에는 PLB를 형성한다. 생장한 덩어리를 배양10주 이내에 분할하여
계대배양하고,이와 같은 방법을 PLB를 계속 증식시켜 나간다.PLB의 증식은 잎이 발생하지 않는 조직을 세로로 절단하는 것보다 칼로 절단하여 계대
배양하는 것이 효율적이다
2. 마디배양
node culture;MOSICH 등 1947
1) 배양재료
10 ∼ 15cm정도 되는 줄기의 마디를 이용한다.
2) 재료의 살균
잎 마른 엽초(dry sheath) 및 그 밖의 바깥조직을 제거한 다음 세척제를 묻힌 부드러운 솔로 줄기를 가볍게 문질러 씻어내며, 그 다음 증류수로 줄기를
씻고 Clorox 용액과 증류수를 1:1로 희석한 용액에 살균한다. 살균이 끝나면 절편조직을 1∼2분간 멸균수에 담가둔다.
3) 배지
수정한 Knop 배지 <표 5>를 초기배양에 이용하며, 여기에 줄기의 기부를 접종할 때에는 trans-cinnamic acid 150mg/l,줄기의 중간부위 마디를 배양
할 때에는 15mg/ 줄기의 정부마디를 이용할 때에는 1.5mg/l을 첨가한다. 신초가 형성되면 발근시키기 위하여 LAA 0.5mg/l을 첨가한 Murashige-Skoog
배지로 옮겨 준다.
<표 5>Dendrobium 마디배양용의 수정한 Knop 배지 조성표
구성물질
첨가량/
농축용액
농축용액 첨가량 1
다량원소
Calcium nitrate[Ca(NO3)2.4H2O]
500mg
50g/
10mg
Potassium nitrate(KNO3)
125
12.5g/
10mg
Magnesium sulfate(MgSO4..7H2O)
125
12.5g/
10mg
potassium phosphate(KH2PO4)
125
12.5g/
10mg
철
ferric citrate(FeC H O.3H2O)
10mg
1g/
10m
미량원소
Boric acid(H3BO3)
0.056mg
56mg/
1m
Manganese chloride(MnCl2.4H2O)
0.036mg
36mg/
1m
zinc chloride(ZnCl2)
0.152mg
152mg/
1m
cobaltous chloride(CoCl2)
0.02mg
20mg/
1m
Copper chloride(CuCl2.2H2O)
0.054mg
54mg/
1m
Sodium molybdate(Na2MoO3.2H2O)
0.5mg
25mg/
1m
ferric chloride(FeCl3.6H2O)
0.8mg
500mg/
1m
Na2 EDTA
800mg/
1m
항옥신
trans-cinnamic acid
150.15또는 .5mg
15g/100m 95%에탄올
1,0.1또는0.01m
비타민
thiamine(비타민 B1)
0.4mg
100mg/100m 95%에탄올
0.4m
시토키닌
6-benzyl amino purine(benzyl denine
2.0mg
100mg/100m 95%에탄올
2.0m
당
Sucrose
20g
증류수
1,00m
한천
13g
배지의 PH
5.5
5. 배양방법
줄기를 증류수로 씻은 후 줄기 전체 마디수의 25∼33%를 포함한 상부,30∼50%를 포함한 중부 그리고 25∼33%를 포함한 기부조직으로 나눈다.
상부조직은 5∼7분, 중부조직은 10∼15분, 기부조직은 20∼25분간 살균한다. 절단면 부근은 살균에 의하여 퇴색되기 때문에 살균 후 절단하여 버린다. 이때 상부조직은 5∼7.5cm,중부조직은 1.5∼7.5cm,기부조직은 1.5∼2cm 길이로 절단한다. 절편체를 분리할 때 주의할 점은 마디의 눈으로부터 양쪽
절단면이 0.75cm정도 떨어지도록 해야 한다. 절편체는 절편체 크기의 반 정도가 한천에 묻히도록 치상한다. 신초가 1.5∼2cm로 생장하였을 때 발근용
배지로 옮겨 주면 2주 이내에 뿌리가 형성된다.
6. 참고사항
절편체의 눈은 접종 4주후부터 생장하기 시작하고, 6주 이내에 완전한 유식물체로 자란다.Knop배지에서는 거의 발근되지 않기 때문에 발근시키기
위해서는 발근용 배지로 옮겨 주어야 한다. 마디배양의 경우 부착된 눈에서 신초가 자라나오기 때문에 눈 당 1개의 식물체를 얻을 수 있고,성공률도
75∼100%에 달한다. 그러나 모본에서 줄기를 절단해야 하기 때문에 모본을 해치는 불리한 점이 있다

키워드

식물,   조직배양,   거베라,   카네이션,   백합