일반생물학실험-세균의 형태관찰 및 그람염색법

목차

1. Title

2. Date

3. Purpose

4. Introduction

5. Materials

6. Methods

7. Results

8. Discussion

9. Reference

본문내용

간 내에 발생한다.
(3) Bacillus subtilis
자연계에 널리 분포하는 비병원성 세균으로, 특히 공기 ·마른 풀 ·하수 ·토양 속에 존재한다. 막대 모양의 간균으로 편모가 있어 활발히 운동하며, 균체의 중앙에 원형 또는 난원형의 아포(芽胞)를 형성한다. 보통의 배양기에서도 잘 발육하며 회백색의 큰 취락을 형성하고 그 주위는 방사상을 이룬다.
이 균의 특징은 아포를 갖고 있어 저항력이 강하며, 균체는 글리코겐을 함유하는 그람양성균인 점과 다수의 탄수화물을 분해하여 산을 생성하는 점이다. 또, 30∼70℃에서 가장 잘 증식하며, 50∼56℃의 고온에서도 잘 발육되는 것 등을 들 수 있다. 쌀밥이 부패하는 원인도 이 균에 의한 경우가 많으며, 또 비병원성이지만 불결한 물질에 의해 안구가 손상되었을 때에는 결막염 ·홍채염 등 만성화농증 등을 일으키는 경우가 있다.
Materials
현미경, slide glass, cover glass, crystal violet, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Xylene, lens paper, 알코올램프, 백금이, immersion oil
Methods
① 슬라이드 글라스를 알코올로 깨끗이 닦아 지방을 제거한다.
② 백금이를 알코올램프에 멸균한다.
③ 배지에 대어 식힌다.
④ 백금이에 균을 살짝 묻혀 슬라이드 글라스에 얇게 도말한다.
⑤ 백금이를 알코올 램프에 멸균한다.
⑥ 도말한 균에 crystal violet을 한방을 떨어뜨리고 30~60초간 염색되게 기다린다.
⑦ 흐르는 물에 가볍게 씻고 주변의 물기를 제거한다.
⑧ 커버 글라스를 씌우고 현미경으로 검경한다.
⑨ 같은 방법으로 다른 균을 관찰한다.
Results
1. Staphylococcus aureus 관찰(100X)
2. Escherichia coli 관찰(100X)
3. Bacillus subtilis 관찰(100X)
Discussion
이번 실험에서 배울 것은 현미경 검경을 통해 세균의 형태를 관찰하는 것도 한 부분이겠지만 그 보다는 미생물학에서 널리 이용되고 있는 중요한 분별염색법인 그람염색법을 이해하고 직접 염색과정을 익히는 것이다.
세균의 염색과정에서 화염 고정, 알코올 탈색과 safranin으로의 그람음성균 염색을 생략한 부분적인 그람염색 실험이었지만 crystal violet만으로도 준비된 세균을 충분히 관찰 할 수 있었다.
첫 번째 균인 Staphylococcus aureus 는 coccus란 이름에서와 같이 구균을 띄며 세균이 모여있는 곳을 관찰하면 포도송이처럼 붙어있는 구모양의 형태를 관찰할 수 있었다. Escherichia coli 는 간균의 형태이지만 끝 모양이 뭉뚝하게 변형된 둥글둥글한 간균의 형태였다. 그리고 마지막으로 Bacillus subtilis는 전형적인 간균의 형태를 띠고 있었다.
이들 세균은 ㎛단위의 아주 작은 크기이기에 현미경의 최고배율인 100X에 immersion oil을 묻혀 관찰 해야만 했다. 염색처리하고 관찰하니 세균의 상도 쉽게 찾을 수 있었고 형태 또한 쉽게 관찰할 수 있었다. 다만 아쉬운 점이 있다면 (+)charge를 띄는 염색시약 외에 (-)charge를 띄는 India ink로의 염색처리를 실험하지 못해봤다는 점이다.
Reference
미생물학 실험 -기초와 응용- / 미생물학 실험교재 편찬위원회 편 / 월드 사이언스 / 2000 / p60
Brock의 미생물학 제 11판 / 대표역자 오계헌 / 월드 사이언스/ 2006 / p58-59, 63-64, 74-75, 294, 353, 864-865, 931
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키워드

그람염색,   세균형태,   현미경