목차
1. subject
2. introduction
2.1. 동물의 조직에서 DNA를 추출하는 이유
2.2. DNA를 추출하는 방법
2.3. 전기영동의 분석
3. materials
3.1. 재료
3.2. 시약
3.3. 장치
4. methods
5. result
6. discussions
6.1. 결과분석
6.1.1. 추론1
6.1.2. 추론2
6.2. 원인분석
2. introduction
2.1. 동물의 조직에서 DNA를 추출하는 이유
2.2. DNA를 추출하는 방법
2.3. 전기영동의 분석
3. materials
3.1. 재료
3.2. 시약
3.3. 장치
4. methods
5. result
6. discussions
6.1. 결과분석
6.1.1. 추론1
6.1.2. 추론2
6.2. 원인분석
본문내용
대체로 비례하는 것은 DNA가 많은 튜브 안에는 RNA도 많을 수 있기 때문이다.
200ul보다 400ul에서 상하로 더 길게 나타나는 것은, 동일한 범위내의 RNA가 있으나 200ul에서는 그 양이 적어 육안으로 식별하기 어렵기 때문이다. 이것은 B2조 200ul과 400ul을 비교하였을 때 동일하게 실험하고 양만 달리 하였으나 전기영동의 결과에 차이가 나타나는 것을 통해 알 수 있다
RNA의 길이는 한가지가 아니므로 분자량의 차이에 따라 위아래로 끌리는 현상은 없앨 수 없다고 판단된다. 즉, 두 번째 띠가 더 밝게 나타나게 할 수는 있으나, 그 폭을 줄일 수는 없다.
전기영동의 결과가 깨끗하고 뚜렷하지 않은 이유
이물질의 DNA이동 방해이물질이 DNA의 이동을 방해하거나 DNA와 엉켜서 일부분의 저항이 커졌을 수 있다. 첫 번째 띠를 살펴보면 B2 B3조의 400ul의 띠에서 위로 삐친 부분을 발견 할 수 있는데 이런 부분들이 이물질이 DNA에 결합되거나 이동을 방해하여 다른 부분들 보다 천천히 이동하게 된 결과라고 생각된다. 실험과정중에 최대한 많은 양의 DNA를 확보하기 위해 penol / chloroform층과 수용액층의 분리시에 층의 아슬아슬한 부분까지 옮겼다. 이 과정에서 하층의 일부가 딸려 올라간 것으로 보이다. 처음 충분한 양의재료를 준비하고 상층액을 얻어낼 때 안정적인 부분까지만 옮긴다면 pellet의 순도를 높이는데 도움이 될 것이다.또한 처음 실험 재료를 준비할때부터 다른 기관 혹은 기관내 이물질이 포함되지 않도록 준비하는 것도 pellet의 이물질의 양을 줄이는데 도움이 될 것으로 보인다.
정제과정의 부족protenase, RNase, penol, chloroform 처리를 각각 한번씩 밖에 하지 않았다. 정제 과정을 여러번 반복할수록 순도 높은 DNA를 얻을 수 있을 것이다. 하지만 정제를 할수록 DNA는 데미지를 입기 때문에 손실율이 높아 지고 총량이 감소 할 수도 있으니 주의해야 한다.
DNA 총량의 부족 (B1의 결과처럼 gDNA 띠가 흐릿하게 나온 원인)띠가 흐리게 나온 것은 DNA의 양의 부족하기 때문이다.실험 과정중에 두 개의 상층액을 분리하여 두 개의 튜브에 옮겨 담는 과정이 있었는데 이중 하나의 튜브를 만들 때 피펫에서 팁이 빠져 약 500ul의 상층액을 잃었다. 결국 남은 튜브를 둘로 나누어 230ul씩 두 개의 튜브를 만들어 실험을 진행하였으나, DNA의 양의 부족으로 전기영동에서 흐릿한 띠가 나타나게 되었다. 실험재료 준비에서 충분한 양의 DNA를 확보하며, 실험과정 중에서 실수로 DNA가 담긴 용액을 손실하지 않도록 주의 한다.
일부 DNA의 손실에 의한 분자량의 변화 (DNA들간의 분자량의 차이 발생)정제과정중에 inverting시 과도하게 흔들거나, 튜브를 떨어뜨려 물리적 충격을 가하는 등 DNA의 손실을 생길 수 있다. 띠 안에는 DNA가 하나가 있는 것이 아니라 각 세포들에 들어있던 gDNA들이 있는 것이다. 따라서 일부가 손실된 DNA들은 더 멀리 이동할 것이므로 손실된 DNA가 많아질수록 띠가 상하로 폭이 길어질 수 있을 것으로 보인다.
참고사항
· 실험을 끝내고 남은 폐기물에는 발암물질들이 포함되어있으므로 그냥 버리면 안된다.
· 팁의 표면이 외부물질과 접촉했을 시 폐기하고 새로운 팁을 사용해야 시약의 오염을 막을 수 있다.
· 팁에 물질이 들어있는 채로 마이크로피펫을 거꾸로 들면 내부가 망가질 수 있으니 주의해야 한다.
참고자료
네이버 백과사전
http://blog.naver.com/myfreemail/70035640066
http://www.cyworld.com/immunoplay/135791
200ul보다 400ul에서 상하로 더 길게 나타나는 것은, 동일한 범위내의 RNA가 있으나 200ul에서는 그 양이 적어 육안으로 식별하기 어렵기 때문이다. 이것은 B2조 200ul과 400ul을 비교하였을 때 동일하게 실험하고 양만 달리 하였으나 전기영동의 결과에 차이가 나타나는 것을 통해 알 수 있다
RNA의 길이는 한가지가 아니므로 분자량의 차이에 따라 위아래로 끌리는 현상은 없앨 수 없다고 판단된다. 즉, 두 번째 띠가 더 밝게 나타나게 할 수는 있으나, 그 폭을 줄일 수는 없다.
전기영동의 결과가 깨끗하고 뚜렷하지 않은 이유
이물질의 DNA이동 방해이물질이 DNA의 이동을 방해하거나 DNA와 엉켜서 일부분의 저항이 커졌을 수 있다. 첫 번째 띠를 살펴보면 B2 B3조의 400ul의 띠에서 위로 삐친 부분을 발견 할 수 있는데 이런 부분들이 이물질이 DNA에 결합되거나 이동을 방해하여 다른 부분들 보다 천천히 이동하게 된 결과라고 생각된다. 실험과정중에 최대한 많은 양의 DNA를 확보하기 위해 penol / chloroform층과 수용액층의 분리시에 층의 아슬아슬한 부분까지 옮겼다. 이 과정에서 하층의 일부가 딸려 올라간 것으로 보이다. 처음 충분한 양의재료를 준비하고 상층액을 얻어낼 때 안정적인 부분까지만 옮긴다면 pellet의 순도를 높이는데 도움이 될 것이다.또한 처음 실험 재료를 준비할때부터 다른 기관 혹은 기관내 이물질이 포함되지 않도록 준비하는 것도 pellet의 이물질의 양을 줄이는데 도움이 될 것으로 보인다.
정제과정의 부족protenase, RNase, penol, chloroform 처리를 각각 한번씩 밖에 하지 않았다. 정제 과정을 여러번 반복할수록 순도 높은 DNA를 얻을 수 있을 것이다. 하지만 정제를 할수록 DNA는 데미지를 입기 때문에 손실율이 높아 지고 총량이 감소 할 수도 있으니 주의해야 한다.
DNA 총량의 부족 (B1의 결과처럼 gDNA 띠가 흐릿하게 나온 원인)띠가 흐리게 나온 것은 DNA의 양의 부족하기 때문이다.실험 과정중에 두 개의 상층액을 분리하여 두 개의 튜브에 옮겨 담는 과정이 있었는데 이중 하나의 튜브를 만들 때 피펫에서 팁이 빠져 약 500ul의 상층액을 잃었다. 결국 남은 튜브를 둘로 나누어 230ul씩 두 개의 튜브를 만들어 실험을 진행하였으나, DNA의 양의 부족으로 전기영동에서 흐릿한 띠가 나타나게 되었다. 실험재료 준비에서 충분한 양의 DNA를 확보하며, 실험과정 중에서 실수로 DNA가 담긴 용액을 손실하지 않도록 주의 한다.
일부 DNA의 손실에 의한 분자량의 변화 (DNA들간의 분자량의 차이 발생)정제과정중에 inverting시 과도하게 흔들거나, 튜브를 떨어뜨려 물리적 충격을 가하는 등 DNA의 손실을 생길 수 있다. 띠 안에는 DNA가 하나가 있는 것이 아니라 각 세포들에 들어있던 gDNA들이 있는 것이다. 따라서 일부가 손실된 DNA들은 더 멀리 이동할 것이므로 손실된 DNA가 많아질수록 띠가 상하로 폭이 길어질 수 있을 것으로 보인다.
참고사항
· 실험을 끝내고 남은 폐기물에는 발암물질들이 포함되어있으므로 그냥 버리면 안된다.
· 팁의 표면이 외부물질과 접촉했을 시 폐기하고 새로운 팁을 사용해야 시약의 오염을 막을 수 있다.
· 팁에 물질이 들어있는 채로 마이크로피펫을 거꾸로 들면 내부가 망가질 수 있으니 주의해야 한다.
참고자료
네이버 백과사전
http://blog.naver.com/myfreemail/70035640066
http://www.cyworld.com/immunoplay/135791
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