혈액형 검사

소개글

혈액형 검사에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

찰합니다.
4) 모든 음성반응은 현미경으로 확인합니다.
5) 음성 결과가 나오면 미리 준비한 IgG감작 적혈구에 항글로불린 혈청을 첨가한 후 다시
원침하여 양성임을 확인하여야 합니다. 만일 IgG감작 적혈구가 양성으로 나오지 않으면
검사가 잘못된 것이므로 재검사를 시행합니다.
◈ Antibody Screening Test
적혈구 표면에는 ABO 이외에도 Rh, Duffy, Kidd, Kell, Lewis 등 수많은 적혈구 항원들이 존재하는데 이들은 면역원성이 낮아 이들에 대한 항체 형성 유무를 예측하기가 어렵습니다. 그래서 비예기항체(unexpected antibody)라고 부릅니다. 비예기항체는 반응할 수 있는 항원이 존재하는 적혈구를 수혈할 경우 용혈성 수혈부작용을 일으킬 수 있으므로 수혈하기 전에 반드시 비예기항체를 선별하는 검사를 시행하여야 합니다.
◈ 검체
종 류
양
부적절 검체
혈액(plain tube)
5 mL
- 양 : 전혈량이 2 ml 이하 - 상태 : 용혈된 혈액 - 지체 기간 : 채혈 후 24시간 이상 경과된 검체
◈ 검사방법
1. Microplate 법
1) V자형 microplate를 준비하여 plate의 두 개의 well에 검사하고자 하는 혈청을 1- 2방울씩
넣습니다.
2) 한쪽 well에 0.2% 항체선별용 혈구-I을, 다른 한쪽 well에 혈구-II을 1 방울씩 넣습니다.
3) Vortex mixer나 tray mixter로 잘 혼합합니다.
4) Microplate를 37℃에서 30분간 항온시킵니다.
5) Microplate를 2000rpm에서 10 초간 원심 침전시킵니다.
6) 70 경사의 viewer에 microplate를 세워 놓고 각 well의적혈구가 흘러 내리게 한 뒤 10분
경과후 판독합니다.
7) Microplate를 2000 rpm에서 10 초간 원심침전후 상층액을 털어 버립니다.
8) 1:5 희석 항글로불린 혈청을 각 well에 1방울씩 넣습니다.
9)2000 rpm에서 10 초간 원심침전합니다.
10) 70 경사의 viewer에 microplate를 세워 놓고 8분후 판독합니다.
2. Tube 법
1) 시험관 3개 준비 : I, II, III으로 표시합니다.
2) 각 tube에 검사하고자 하는 혈청 2 방울씩을 넣습니다.
3) I 에는 Screening Cell I을, II에는 Screening Cell II를, III에는 2-5% 피검 적혈구
(자가대조용) 1방울씩을 각각 넣습니다.
4) 잘 섞은 후 실온에서 10분 반응시킵니다.
5) 3400rpm 15초 원심후 용혈및 응집유무를 기록합니다.
6) 각각의 tube에 22% bovine albumin을 1방울씩 넣어 37℃ waterbath에서 30분간
incubation합니다.
7) 3400rpm에서 15초 원심 후 용혈 및 응집유무를 기록합니다.
8) 각각에 생리식염수를 넣어 3-4회 세척합니다. (마지막 세척후 생리식염수를 완전히 제거합니다).
9) 각각에 AHG 혈청 1 방울씩을 떨어뜨리고 잘 섞은 후 원심후 판독합니다.
10) 반응이 음성이거나 약한 경우는 Coombs control cell 1방울 넣고 응집이 일어나는 것을
확인합니다.
3. Column agglutination test (Gel test)
1) Gel Card에 환자명을 적은 후 호일을 제거합니다.
2) 0.8% 선별혈구 또는 동정혈구를 각 Microtube에 50 ㎕씩 분주합니다.
3) 각각의 Microtube에 환자의 혈청(25 ㎕)을 넣습니다.
4) Incubation을 37℃, 15분간 실시합니다.
5) Centrifugation을 10분간 시행한 후 판독합니다.

키워드

혈액형,   ABO 혈액형,   Rh 형