탁도를 이용한 미생물 농도 측정(결과)

소개글

탁도를 이용한 미생물 농도 측정(결과)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1.실험 결과
(1)균이 자란 플라스크로부터의 냄새를 맡아보시오. 어떤 냄새가 나는가? 효모의 성장 및 배양 특성, 생산물 등에 대해 조사해서 기술하시오.
(2)희석 배수에 따라 x축을 cell dry weight로 y축을 optical density로 하여 상관 관계식을 구해본다.
(3)Cell농도를 측정하는 여러 가지 직접, 간접적인 방법에 대해 기술해보시오.
(4)DNS측정에 의한 잔류 포도당 농도

2.토 의

3.결 론

4.참고 문헌

본문내용

, 믿을 수 있고 엄격한 공정계기는 MS를 보다 실질적으로 산업에 응용할 수 있게 만들었다.
③온라인 감지기
광흡수(분광광도계) 또는 산란(탁도측정법), 반사율 측정에 기초를 둔 광학적 방법들은 널리 연구되어 왔다.
배양액의 형광강도는 세포의 밀도, 평균 세포의 대사상태 및 형광발산도, 그리고 배양액에 의한 빛의 흡수에 의존한다. 입자가 없는 배양액에서 형광을 측정하므로 균체의 농도, 산소의 전달, 반응기 혼합시간, 기질의 소모, 대사의 전이 등에 대한 유용한 정보를 얻을 수있음이 실험을 통하여 밝혀졌다.
세포배양액의 경우에 직접 광학측정기를 사용하는 경우 측정치의 해석을 방해할 수 있는 많은 잠재적 문제점이 발생한다.
④오프라인 분석법
생물반응기내의 바람직한 측정 항목들은 속도론에 영향을 주는 성분과 기질의 농도, 그리고 반응생성물이나 방해제의 농도이다. 발효시 탄소와 질소원의 분석이 바람직하다. 또한 배양액내의 마그네슘이나 인과 같은 어떤 이온의 수준을 측정하는 것이 바람직할 수 있다.
액상의 정량적 분석은 보통 빛의 굴절, 특정 파장에서의 빛 흡수, 또는 한 파장에서 여기되어 더 긴 파장에서 방출되는 형광에 기초를 둔다.
또한 크로마토그래피 방법에 의한 유사물질을 더 작은 단위로 분리하는 방법은 배양액을 화학적으로 분석하는 데 적용된다.
(4)DNS측정에 의한 잔류 포도당 농도
시료 흡광도= 0.292
시료 잔류포도당 농도= 0.03273mg/mL
포도당 농도
흡광도
0
0
0.018
0.008
0.061
0.016
0.117
0.024
0.298
0.032
0.452
0.040
0.639
0.048
0.793
0.056
▶왜 포도당이 남아 있는가?
유기호흡에 의한 포도당의 분해는 다음과 같다.
여기서 CO2와 H2O는 에너지를 가지고 있지 않다. 즉, 포도당을 모두 소비했다는 것이다. 이에 반해 효모의 발효과정을 살펴보면 다음과 같다.
유기호흡의 산물인 CO2와 H2O와는 달리 에탄올은 연료로도 사용할 수 있을 정도의 에너지를 가진 물질이다. 그러므로 포도당을 다 분해시키지 않더라도 에탄올이 생성되게 된다. DNS실험으로 포도당의 농도를 측정한 결과 0.03273mg/mL만큼의 잔류 포도당이 남아있음을 확인할 수 있었다.
2.토 의
이번 실험에서는 효모를 배양시킨 후 흡광도를 측정하여 탁도에 따른 농도를 확인해보았다. (dry cell weight) VS (optical density)를 plot했을때 직선에 가까운 선을 보여야 했지만, R2값이 0.9494로 약간의 오차가 있었음을 확인 할 수 있었다.
오차의 원인을 살펴본다면 배양액을 만들 때, 시료 투입량이 소수점까지 내려가는 미세한 양이었기 때문에 약간의 측정오차가 발생하였다. 이런 미세한 양에서의 약간의 오차는 결과 치에서 큰 영향을 가져올 수 있다.
그리고 실험을 진행하면서 기다리는 시간이 길었기 때문에 실험 진행동안 효모의 농도가 계속 변화하였을 것이다.
또 실험 중 한 번의 실수가 있었는데, Clean bench안에 자외선이 켜진 것을 확인하지 못하고 배양중인 플라스크를 놓아두어 효모가 일부 파괴되었을 것으로 추정된다. 하지만 원심분리실험만을 남겨둔 상태였고, 효모가 파괴되었다하더라도 그 무게에는 별로 영향을 끼치지 않을 것이므로 실험을 계속 할 수 있었다.
DNS실험으로 잔류 포도당의 존재를 확인했고, 효모가 Glucose와 알코올 발효를 일으켰음을 알 수 있었다.
효모의 배양조건을 잘 파악하고, 좀 더 적합한 환경에서 실수 없이 실험을 진행한다면 보다 정확한 실험이 될 것이다.
3.결 론
효모와 Glucose가 알코올 발효로 인해 생성된 Cell의 dry weight/흡광도의 그래프를 작성결과 Y = 71.771X + 0.1344라는 수식을 얻을 수 있었다. 그리고 발효가 끝난 배양액의 잔류 포도당 농도는 0.03273mg/mL으로 알코올 발효에서 포도당은 완전 분해되지 않는 것을 확인 할 수 있었다.
4.참고 문헌
①생물화학공학/주식회사 서울외국서적/James E. Bailey, David F. Ollis/
1991.2.15/p.275~278, p.658~673 *실험결과(3)에 적용
②생물공학/유한문화사/고정삼외5명/2003.2.10/p.46~47 *실험결과(1)에 적용
③산업미생물학/민음사/배무/1992.1.20/p.179~181 *실험결과(1)에 적용
④과메기에서 Histamine 분해능을 가진 세균의 분리 동정/김민우/동의대 대학원/
2006.2/p.9 *실험결과(1)에 적용

키워드

효모,   분열법(fission),   혐기성 대사생성물,   출아법(budding),   영양번식