<실험> 헤모글로빈 단백질의 겔 여과 크로마토그래피

소개글

<실험> 헤모글로빈 단백질의 겔 여과 크로마토그래피에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Introduction

2. Material & Methods

3. Results & Discussion

(1)methaemoglobin-oxyhaemoglobin transition in GPC
(2) Determination of Haemoglobin's molecular weight

4. Reference

본문내용

volume 된다.
Void volume 인 Vo는 겔 분자체 주위에 있는 용매가 차지하는 공간으로 일반적으로 겔 베드 총 부피(Vt)의 약 35%가 된다. 우리가 사용한 컬럼은 염료(dye)인 blue dextran (MW 2000)으로 Vo를 보정(calibration)하여 Vt=90ml , Vo=40ml 이 된다. Elution volume인 Ve는 Hb분자가 컬럼을 지나서 밖으로 나올 때 까지 용액의 부피를 의미한다. 위 그래프에서 나타난 결과로 계산해보면 sample 9번이 최대 흡광도를 나타내기 때문에 9×3ml =27ml값을 Vo 값 40ml과 더해주면 Ve =67ml 이 된다.
REV = Ve/Vo
R = = Vo/Ve
*　Kav = (Ve-Vo)/Vx
- REV는 상대적인 용리부피(relative elution volume)
- R은 지연상수(retention constant)
* Kav = partition or distribution constant
Kav를 이용하면 이미 분자량을 알고 있는 물질들과 비교하여 시료의 분자량을 측정할 수 있다. 실험결과로 Kav 구하면, Kav = (Ve-Vo)/Vx = (67-40)/90 =0.3 이 된다. 이 값을 이용해서 역으로 분자량을 계산해보면 대략 64500 정도가 되는 것을 알 수 있다. 이는 standard 단백질 중 알부민과 유사한 값이다.
4. Reference
http://biosci.snu.ac.kr/
http://www.cheric.org/ippage/e/ipdata/2001/12/file/e200112-08.hwp

키워드

겔여과크로마토그래피,   헤모글로빈,   분자량 예측,   분배계수,   GPC,   protein standards,   크로마토그래피