생물학실험 - 원생생물관찰, 박테리아의 운동성, PTC 미맹검사, 척추동물해부, 혈구세포 관찰 및 혈액형 판정

목차

원생 생물 관찰

1. 현미경의 사용방법
2.현미경 사용시 유의점
3.원생생물(Protozoa)이란?
4.원생생물의 분류 Family : Protista(원생생물계)


박테리아의 운동성

1. 박테리아의 주화성(chemotaxis)


형질전환


PTC 미맹검사

1. PTC 미각능력
2. 멘델의 유전법칙
3. Hardy-Weinberg의 법칙


척추동물해부

1. 토끼 hare, rabbit/Lagomorpha
2. 토끼의 외형관찰
3. 내부구조 개요
4. 해부생리학적 특징
5. 토끼의 소화기관 - 입 속
6. 토끼의 소화기관 - 식도
7. 토끼의 소화기관 - 위
8. 토끼의 소화기관 - 창자
9. 토끼의 소화기관 - 소화관의 내부
10. 토끼의 소화기관 - 소화선
11. 이용분야


혈구세포 관찰 및 혈액형 판정

Ⅰ. 혈액(Blood)
1. 혈구
1-1. 적혈구
1-2. 백혈구
1-3. 혈소판
2. 혈장
Ⅱ. 혈액형판정
1. 적혈구 항원형
2. 백혈구 항원형
3. 혈액형의 검정
Ⅲ. 실험 방법
1. 혈액 채취
2. 혈구 관찰
3. 혈액형 분석

본문내용

ultiple allele) IA, IB 및 ｉ에 의하여 결정되며, IA, IB는 공우성(codominance)으로 작용하고 ｉ에 대해서는 각각 우성으로 작용한다. 따라서 조합이 가능한 6종의 유전자형 중 표현형으로 구별되는 것은 4종뿐이다.
IA, IB, ｉ의 유전자 빈도 p, q, r은 아래와 같은 식으로 계산할 수 있다.
p = √(A+O) - √O
q = √(B+O) - √O 또는 q = (1-p-r)
r = √O
동양인 집단에 있어서는 평균이 p = 0.27, q = 0.17, r = 0.56으로 보고되어 있다.
혈액형 물질의 화학구조에 관한 연구결과에 의하면, 적혈구에서 알코올 추출로 분리한 혈액형 물질은 스핑고당지질(sphingoglycolipid)이며, 수용성 혈액형 물질은 당단백질이다. 혈액형의 특이성은 이들 당구조식의 말단기에 있으며, 전구체(precursor)에 푸코스(fucose)가 부가되면 H항원이 되는데, 이 물질은 어떤 종류의 식물종자에서 추출한 물질과도 반응하며, ABO 항원성의 기본구조를 이룬다. 그런데 그 H항원 구조의 말단에 N-아세틸-D-갈락토사민(N-acetyl-D-galactosamine)이 첨가되면 A항원, D-갈락토오스(D-galactose)가 첨가되면 B항원이 된다. 따라서 혈액형을 지배하는 유전자에 의해 생성되는 물질은 이들 당을 적혈구의 세포막에 첨가하는 전이효소(transferase)라고 생각된다.
2. 백혈구 항원형
사람의 경우 ABO 혈액형과 똑같이 조직 적합성에 관여하는 주요한 항원으로 최근에 활발히 연구되고 있는 것 중의 하나가 백혈구항원형(human leucocyte antigen type)이며, 이를 HLA형이라고 한다. 이 항원을 지배하는 유전자는 연관하여 있는 A, B, C, D 및 DR 5개가 알려져 있으며, HLA형의 특성은 대립유전자의 종류가 많다는 점이다. 예로 A, B 2개의 유전자좌에는 적어도 각각 15종과 23종의 대립유전자가 있음이 알려져 있어 이들이 조합을 이룰 때 그 종류는 15×23 = 345가지나 된다. 따라서 이들을 동형접합체나 이형접합체로 갖게 되는 각 개인의 유전자형의 종류는 대단히 많다. 이러한 이유로 인해 유전자형의 종류는 대단한 수가 된다. 현재 HLA형은 개개인을 서로 구별한다든가, 친자를 감정할 때 가장 효과적인 유전표지(genetic marker)가 되고 있으며, 뿐만 아니라 HLA형의 유전자형에는 특정 지환과 관련을 가지는 것이 있어 주목을 끌고 있다.
HLA형과 같이 연쇄된 유전자좌의 대립유전자 사이에는 연관불평형(linkage disequilibrium)이 발견되는 때가 있다. 이 연관불평형은 한 집단에서 어떤 하플로타입(haplotype)의 2유전자좌에 나타나는 유전자빈도를 각각 곱한 이론적인 빈도와 실제로 나타나는 빈도가 다른 현상을 말한다. 예를 들면 A좌의 A1 및 B좌의 B8이라는 대립유전자의 빈도가 북유럽 집단에서는 각각 0.17과 0.11이다. 만일 집단의 규모가 충분히 크고 유전자좌 사이에 상호작용, 즉 상위작용(epistasis)이 없다면, 하플로타입 A1:B8의 빈도는 이들 빈도를 곱한 것, 즉, 대체로 0.02가 되겠지만, 실제로 관찰된 하플로타입의 빈도는 0.09이다. 이러한 현상은 이 하플로타입을 높은 빈도로 가지고 있는 집단과의 혼혈 대문이거나, 혹은 어떤 요인으로 인하여 A1:B8 조합이 선택되어졌기 때문이 아닌가 추정된다. 여기서 말하는 하플로타입이란, 1개의 염색체 위의 A, B, C, D 및 DR의 각 유전자좌에 존재하는 1개씩의 대립유전자를 가진 경우를 의미하는데, 한 개인은 아버지와 어머니로부터 각각 유래한 2개의 하플로타입을 가진다.
3. 혈액형의 검정
사람의 혈액형은 ABO형과 Rh형 등이 있으며 혈액형 검정의 원리는 항원-항체 반응이다. 항원은 항원과 반응하는 항체를 만나면 서로 반응하여 혈액의 응고가 일어나며 항원과 항체가 서로 반응하지 않으면 혈액의 응고가 일어나지 않는다. ABO형에서 A형인 혈액은 적혈구 세포 표면에 A라는 항원을 갖고 있으며, B형은 B항원을, AB형은 A와 B항원을 모두 가지고 있고, O형은 어떤 항원도 갖고 있지 않다. 반면 A형의 혈장에는 B형 항원과 반응하는 항체(항혈청 B)가 있으며, B형 혈액은 항혈청 A, AB형은 어떤 항체도 없고, O형은 항혈청 A와 항혈청 B를 모두 갖고 있다. 예로, A형의 혈액을 B형의 혈액을 갖는 사람에게 수혈하면 A형 혈액의 A항원과 B형 혈액의 항혈청 A가 반응하여 응고가 일어난다. 적혈구 세포 표면의 항원은 유전자에 의해 결정되며 전형적인 대립유전자의 형태로 존재한다. ABO형에서 유전자형과 혈액형과의 관계는 표와 같다.
Ⅲ. 실험 방법
1. 혈액 채취
① 소독용 알코올로 새끼손가락을 잘 닦아준 후 일회용 란셋을 이용하여 혈액을 채취한다.
② 준비된 슬라이드 글라스 두 개에 혈액을 적당량 떨어뜨린다.
2. 혈구 관찰
① 슬라이드 글라스에 혈액 한 방울을 떨어뜨린 후 커버 글라스를 이용하여 도말시킨다.(도말이 잘 이루어지지 않으면 혈구들이 겹쳐져 보인다)
② 혈액이 완전히 마르도록 3분간 방치한다.
③ 메탄올을 1~2방울 가하여 5분간 고정시킨다.
④ 메틸렌블루 용액을 1~2방울 떨어뜨린 후 3분간 염색시킨다.
⑤ 흐르는 물로 잉여의 염색약을 제거한다.
⑥ 커버 글라스를 덮고 현미경으로 관찰한다.(×400)
3. 혈액형 분석
① 슬라이드 글라스 한 개에 항혈청 A, 항혈청 B, 항혈청 D를 순서대로 한 방울씩 떨어뜨린다.
② 혈액을 혈청 아래 부분에 조금씩 떨어뜨린 후 이쑤시개로 잘 섞어준다. 이 때 혈액이 너무 많으면 응집 반응이 불안정하여 정확한 결과를 얻기 힘들어진다. 이쑤시개는 혈청 종류당 하나씩 사용하여 섞어준다.
③ 정확한 응집은 약 1분 내에 일어나며 육안으로 응집 유무를 판독한다(판정 시간은 3~5분을 초과하지 않도록 한다). 슬라이드 글라스를 가온하거나 냉각시키면 판정용 혈청이 농축되어 거짓 반응이 나타날 수도 있다(15~30℃의 실온에서 검사). 판정용 혈청의 보존 상태가 좋지 않거나 혈구가 과량일 때 가응집 현상이 나타날 수 있다.

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