단백질정량 실험

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단백질정량 실험에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

olution이 시료속에 들어있는 단백질들과 반응을 하면서 단백질이 많이 들어있을수록 점점 짙은 푸른색을 띄게 되는데 이로 인해 BSA양이 증가할수록 흡광도도 점점 증가하여 이번 실험에서는 전체적으로 이론값과 비슷하게 나온 것을 볼 수 있다. 하지만 마지막 BSA 50μL 의 시료에서 흡광도가 낮아지는 것이 보여지는데 이것은 96 well plate에 피펫으로 시료를 넣을 때 plate 안쪽에 공기방울이 발생을 하여 흡광도를 낮게 만들어서 전체적인 평균이 내려가 평균 흡광도가 낮게 측정이 되었다. 에탄올을 이용하여 공기방울을 없애야 하지만 실험 전에 이러한 것을 숙지하지 못하여 신경을 쓰지 못한 것 같다. 전체적인 오차를 생각을 해보면 실험을 시작할 때 손에 묻어있는 단백질들이 기구에 묻거나 시약들과 반응을 할 수 있는데 생각을 하지 못하고 맨손으로 기구를 만졌던 것이 약간의 오차와 관련이 있는 것 같다. 또한 Bradford method 실험을 하면서 BSA 시약들에 Bradford solution을 넣고 vortex mixer에 섞어줘야 하는데 vortexing 할때의 시간이 오래 걸려 단백질이 약간의 변이가 생기는 것도 생각해볼 수 있다. 게다가 실험 도중에 완충액 등 여러 시약의 영향을 쉽게 받기 때문에 주의해야 한다.
* 참고문헌
1. 네이버 블로그, Bradford method, 2013.01.27.,
http://blog.naver.com/withcoffee67?Redirect=Log&logNo=70157521263
2. 생명과학대사전, 브래드퍼드법, 2008.5.01., 강영희, 243P

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단백질정량실험,   Bicinchoninic acid법,   Kjedahl법