[병원미생물학실험] Kirby-Bauer(커비-바우어(의 항생제 감수성 시험 : 항 미생물 활동의 평가를 위한 Kirby-Bauer 항생제 감수성시험을 실험해보고, 디스크로 항균력을 판단하여 실험 세균에 대한 항균력을 측정

소개글

[병원미생물학실험] Kirby-Bauer(커비-바우어(의 항생제 감수성 시험 : 항 미생물 활동의 평가를 위한 Kirby-Bauer 항생제 감수성시험을 실험해보고, 디스크로 항균력을 판단하여 실험 세균에 대한 항균력을 측정에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 제목 : Kirby-Bauer 항생제 감수성 시험
2. 목적
3. 원리 및 이론
4. 실험과정
5. 시약 및 실험기구
6. 결과
7. 고찰
8. 참고자료

본문내용

시킨다.
② 희석시킨 균을 밀러-힌튼 배지에 overlay한다.
③ 모든 배양접시를 약 5분정도 말린다.
④ 4개의 디스크 2쌍에 항생제(Tetracycline, Ampicillin) 각각을 5㎍/㎖, 10㎍/㎖에 접종하고, 통제변인(control)으로 작용할 디스크 2개에 메탄올을 접종한다.
⑤ 어느 정도 말린 후 멸균한 겸자를 이용해 접종한 디스크를 overlay한 배지에 놓고, 디스크 중앙을 가볍게 눌러 한천 표면에 완전히 부착시킨다.
⑥ 디스크 간의 간격은 충분히 떨어져야 한다. 각 디스크 중심 간의 간격은 24mm 이상이어야 하며 평판 가장자리로부터 15mm 이상 떨어져야 한다.
⑦ 37℃의 인큐베이터에 24~48시간동안 배지를 뒤집어 모든 배양 조직 판을 배양한다.
5. 시약 및 실험기구
E.coli, Bacillus subtilis, 항생제(Tetracycline, Ampicillin)
Mueller-Hinton 배지, 알코올램프, 핀셋, 시험관, 마이크로피펫, 인큐베이터,
페트리접시, disc
6. 결과
5월 17일 18시 22분부터 5월 18일 10시 22분까지 16시간 배양 했다.
E.c의 배지에서는 항생범위가 거의 나오지 않아 직경을 측정할 수 없었다.
B.s의 배지에서는 다음과 같은 결과가 나왔다.
① AMP 5㎍/㎖를 접종한 디스크 주변의 항생범위 직경은 : 1.8cm,
② AMP 10㎍/㎖를 접종한 디스크 주변의 항생범위 직경은 : 2.1CM
③ TET 5㎍/㎖를 접종한 디스크 주변의 항생범위 직경은 : 1.1CM
④ TET 10㎍/㎖를 접종한 디스크 주변의 항생범위 직경은 : 1.3CM
7. 고찰
이번 실험은 균에 대한 항생제 감수성 검사를 해보는 것이었다. 항생제에 대한 균의 내성 존재 여부를 알아보는 것이었는데, E.coli는 억제대가 거의 나타나지 않았다. 우리는 그람양성균으로 Bacillus subtilis를 사용했고, 그람음성균으로 E.coli를 사용하였다. 항생제는 Ampicillin과 Tetracycline을 사용하여 각 세균의 항생제에 대한 감수성을 알아보았다.
실험 결과 그람양성균인 B.S에서는 Ampicillin과 Tetracycline 디스크를 붙인 부분에서 항생범위(억제대)가 관찰되었는데, 이는 Ampicillin과 Tetracycline이 이 세균에 대해 어느 정도 항균작용을 함을 나타낸다. 하지만 항생범위가 나타났다고 해서 이 세균을 억제하기 위해 이 항생제를 쓸 수 있다는 것은 아니다. 항생범위의 크기에 따라 이 세균이 항생제에 저항을 하는지 안하는지를 알아보아야한다. B.S에 대한 Ampicillin과 Tetracycline의 항생범위의 직경은 각각 1.8~2.1cm, 1.1~1.3cm로 실험교재 p.288의 표를 통해 B.S의 생육을 억제하기 위해서 Ampicillin과 Tetracycline을 사용해도 되는지를 알 수 있다.
그람음성균인 E.coli의 경우에는 Ampicillin과 Tetracycline 디스크 주변에서 항생범위가 거의 관찰되지 않았다. 실험교재의 표를 통해 E.coli는 Ampicillin과 Tetracycline에 대한 내성이 있는 것을 알 수 있다.
참고문헌에서 본 바에 의하면 그람양성균은 sulfa제와 페니실린에 대한 감수성이 현저하고 그람음성균은 다소 약하다고 한다. 또한 염색약도 항균작용을 할 수 있다는 것을 알 수 있었다. crystal violet과 같은 triphenylmethane 염료에 의해 그람 양성균은 현저하게 억제되는 반면 그람음성균은 다소 약하게 억제된다고 한다.
디스크에 항생제를 접종할 때 다소 적은 양을 접종하여 억제대가 크게 나타나지 않았고, E.coli의 항생부위는 거의 볼 수 없었다. 조금 더 많은 양의 항생제를 접종했다면 육안으로 쉽게 볼 수 있는 큰 억제대가 생성되었을 것이다.
메탄올을 controler로 사용한 이유
Ampicillin과 Tetracycline 항생제는 항균효과가 있다. 이것을 증명해주기 위해서는 controler(대조군)이 필요한데, 메탄올이 항균효과가 없다는 것을 이미 알고 있었기 때문에 메탄올만 있을 때 항균효과가 없다는 것을 눈으로 보여주기 위해서 사용. 메탄올 controler가 없으면 믿을 수 없는 data가 된다.
8. 참고자료
microbiology 8판
최신 미생물학실험 / 박석기 외 저 / 신광문화사
http://hankukm.com.ne.kr
일반 미생물학 개정판 / 신현성, 이규식 공저 / 형설출판사

키워드

병원미생물학실험,   Kirby-Bauer,   커비-바우어,   항생제 감수성 시험,   항균력,   실험결과,   항균력 측정