토양균streaking (도말) : 채취한 토양균의 sample을 알맞은 배지에 스며들게 접종하여 배양하는 방법을 익히고 single colony를 얻어 본다.

소개글

토양균streaking (도말) : 채취한 토양균의 sample을 알맞은 배지에 스며들게 접종하여 배양하는 방법을 익히고 single colony를 얻어 본다. 에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1.실험주제 : 토양균 streaking

2.실험목적

3.개요
<1> 토양균
<2> streaking (도말)
<3> 실험재료
<4> 세균의 배양 방법:
<9>고체배지를 사용하는 도말법
<4> 멸균의 목적
<10> 배지의 멸균
<5> 여러 가지 소독법

4.실험방법
<1> 도말평판법(streak plate method)
<2> 표면도말법(spread plate method)

본문내용

균조작실, 수술실, 식품저장 창고 및 병원 등에서 널리 사용되고 공기나 물의 살균에도 이용되며 특히 최근 들어서 바이러스 연구실의 무균 작업대 혹은 조직 세포 배양실 등에 흔히 사용된다. 그러나 내부 침투력이 약하기 때문에 살균작용이 주로 표면에서 일어난다.
4.실험방법
<1> 도말평판법(streak plate method)
① 실험대나 손은 70% ethanol 로 소독한 후 실험한다.
② 백금이가 빨갛게 될 때까지 알코올 램프로 멸균하고, 충분히 식힌다.
③ 균주가 담긴 시험관의 입구과 마개도 멸균한다.
④ 멸균한 백금이를 균주가 담긴 시험관에 넣어 균주를 살짝 묻힌다.
⑤ 균주가 묻은 백금이를 이용해 배지의 위쪽 1/3 가량을 도말한다
⑥ 백금이를 다시 불꽃으로 멸균하여 식힌 다음 1차 도말한 부분과 일부 겹치도록
재도말한다.
⑦ 백금이를 다시 불꽃으로 멸균하여 식힌 다음 2차 도말한 부분과 일부 겹치도록
재도말 한다.(3차 도말한 부분이 1차 도말한 부분과 겹쳐서는 안된다)
⑧ 도말이 끝난 배지는 인큐베이터에서 배양한다.
* 주의점
- 백금이를 불꽃으로 충분히 멸균한 후, 충분히 식혀서 사용한다. 식히지 않을 경우 도 말해야 할 포자까지 멸균되고 배지가 녹을 수 있다.
- 백금이의 표면을 세척하여 매끄러운 상태를 유지해야 한다. 매끄럽지 않으면 배지가 파일 수 있다.
- 배지는 충분히 굳히고 말린 다음 사용한다. 잘 마르지 않은 배지는 물방울이 배지 표 면에 떨어져 콜로니를 서로 겹치게 한다.
<2> 표면도말법(spread plate method)
① NA배지에 접종할 균주의 명을 기재한다.
② 2.95%에탄올이 담긴 비커에 삼각 유리봉을 구부러진 부분까지 충분히 담근다.
③ 에탄올로 소독한 유리봉을 알코올램프의 불꽃에 통과시켜 묻어있는 에탄올을 태운다. 배지에 닿을 부분이 아래로 향하게 하여 불꽃을 통과시키고 10~15초 식힌다.
④ 피펫으로 배양액을 피페팅하여 배지의 표면에 주입한다.
⑤ 배지표면의 배양액을 멸균한 삼각 유리봉으로 골고루 가볍게 밀어 퍼지게 한다.
⑥ 도말이 끝나면 배지 뚜껑을 닫아 뒤집어 항온기에서 보관한다. 이 때 항온기의 온도가 25도에서는 48~72시간, 37도에서는 24~48시간 정도 배양한다.
* 주의점
- 유리병에 묻은 에탄올을 태울 때 너무 오래 불꽃으로 멸균하지 않도록 한다.
유리병으로 도말할 때에는 배지의 표면이 파이지 않도록 힘을 가볍게 주도록 한다.

키워드

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