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DNA가 침전되며 침전된 DNA를 적당한 완충용액에 녹임으로써 플라스미드 DNA를 정제할 수 있다.
혹은 이온 교환 크로마토 그래피 법을 이용하여 보다 순수한 plasmid DNA를 정제할 수도 있다.
2) DNA 농도 측정
분광흡광계(spectrophiotometer)를 이용
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DNA가 침전되며 침전된 DNA를 적당한 완충용액에 녹임으로써 플라스미드 DNA를 정제할 수 있다.
혹은 이온 교환 크로마토 그래피 법을 이용하여 보다 순수한 plasmid DNA를 정제할 수도 있다. (Plasmid DNA 분리 &
농도 측정 &
electrophorosis
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박테리아 배양과 수확
세포가 피괴되면서 내용물 유리
DNA를 제외한 모든 성분 제거위해 세포추출물 처리
DNA 용액농축 세포전체 DNA
세포 전체 DNA의 준비
플라즈미드 DNA
플라즈미드 DNA정제
파아지 DNA
박테리오파아지 DNA제법
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DNA 조각들을 클로닝 할 수 있다.
Yeast episomal plasmid (Yep) (효모 에피솜 플라스미드)
.2㎛ 복제 원형 개시점을 가진 효모 벡터
Yeast integrative plasmid (YIp) (효모 삽입 플라스미드)
.복제를 위해 숙주 염색체에 통합을 이끄는 효모 벡터
Yeast replicative plas
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plasmid DNA Midi-prep결과와 비교하여 볼 때 A280이 적게 나타났다. 결과대로 해석하여 본다면 protein의 contamination이 적었다고 할 수 있지만 A280의 OD역시 0.01에 근접한 값이기 때문에 실험이 잘못 수행되었다고 할 수 있다.
=> protein의 OD가 적게 측정
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DNA의 정량
A. 단백질의 정량
1) Bradford assay
2) Lowry method
B. DNA의 정량과 순도 측정
2. 단백질과 DNA의 정량
A. SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
3. LD
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DNA 기술은 1953년 유전자가 DNA라는 사실과 DNA의 구조가 밝혀지면서 예견될 수가 있었다.
이 재조합 DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된
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DNA
sequence, (TTAGGG)n, present at the telomeres of human
chromosomes. Proc Natl Acad Sci USA 1988, 85:6622-6626.
2. Kim NW, Piatyszek MA, Prowse KR, Harley CB, West MD, Ho PL,
Coviello GM, Wright WE, Weinrich SL, Shay JW: Specific
association of human telomerase activity with immortal cells and
ca
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plasmid의 lac gene에 잘 삽입이 되면 lac fragment가 만들어지지 않아서 x-gal이 분해되지 않고 white를 띈다. 또, ligation 할 때, vector와 DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되
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플라스미드 DNA 정제, 유전형질의 전환(Tranfomation), ELISA assay, transfection, 단백질추출, 약물효능평가, 동물실험을 진행...(이하생략) - 자기소개서
1. 동아ST를 선택한 이유와 입사 후 회사에서 이루고 싶은 꿈을 기술해 주세요.
2. 평소 본인
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측정하는 문제
·말이 마차를 끌면 마차도 말에 같은 크기이고 방향이 반대인 힘(반작용)을 미친다. 그렇다면 마차는 어떻게 해서 움직일 수 있을까? 이러한 의문점을 설명하라. ·어린 학생들에게 힘과 에너지의 차이점을 가르치려고 한다. 만
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측정방법을 설명하라
♦ 벤젠에 대해
♦ 벤젠이 평면에 있는지 없는지에 대해
♦ 산염기 개념
♦ 엔트로피와 엔탈피에 대해 설명하시오.
♦ 양자역학
♦ 몰농도와 몰랄농도
♦ DNA염기쌍의 상보적 결합, 그 결합의 종
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