순수배양

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순수배양에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. Title
2. Object
3. Principle & Theory
4. Apparatus & Reagents, Procedure
5. Result
6. Discussion & Feeling
7. Reference

본문내용

희석배수가 일 경우
Bacillus subtilis Escherichia coli
Enterococcus faecalis
2. 희석배수가 일 경우
Bacillus subtilis Escherichia coli
Enterococcus faecalis
3. 희석배수가 일 경우
Bacillus subtilis Escherichia coli
Enterococcus faecalis
위에서 보면 우리조의 Bacillus subtilis의 배지가 이상 한 것을 알 수 있다. 자라야 될 Bacillus subtilis가 안자라고 Escherichia coli가 자란 것이다. 그 사실은 밑의 원액 streaking 사진을 보면 알 수 있다.
4. 원액 streaking
Bacillus subtilis Escherichia coli
Enterococcus faecalis
관찰 되어야 할 Bacillus subtilis 군집은 보이지도 않고 Escherichia coli 군집이 보인다.
그래서 우리는 밑에 보이는 것처럼 다른 조의 Bacillus subtilis배지를 이용해 cell counting을 하였다.
군집의 개수: 에서 Bacillus subtilis 103개, 에서 Escherichia coli 87개, 에서 Enterococcus faecalis 약1410개 였다.
그리고 마지막으로 이번실험에서 제작된 Stock의 모습이다.
이 상태로 deep-freezer에 보관하게 된다.
6. Discussion & Feeling
이번 실험결과를 보면 우리 조의 Bacillus subtilis배지를 만들기 위해 사용한 원액이 문제가 있었음을 추측 할 수 있다. 우리 조 모든 Bacillus subtilis배지에는 Escherichia coli가 관찰 되었다. 콜로니의 외관상 구조만 보고 판단하기는 성급하지만, 우리 조의 Bacillus subtilis배지의 군집은 광택이 있었고 크기 또한 Escherichia coli같아 보였다. 아마 희석할 때 Escherichia coli가 들어 갔거나, 사용한 원액이 Escherichia coli였을 경우, 아니면 over-lay하려고 배지에 용액을 주입하는 과정을 하는 사람의 조작 미숙으로 나는 추정한다. 그리고 cell counting을 할 때 로 희석한 Enterococcus faecalis의 군집 수가 너무 많아
비례식을 세워서 풀 수 밖에 없었다.
옆에 보이는 것 처럼 자로 샬레의 원 중심에 구역을 설정해 그 내부의 Enterococcus faecalis의 군집을 센다. 그 수가 132개 였는데 원의 넓이는 이므로 군집의 수는 반지름의 제곱에 비례할 것이다(전체적으로 골고루 퍼져있다는 가정하에). 우리가 정한 구역의 반지름은 1.3이였고 샬레의 반지름은 4.25였으므로 이런 비례식을 세울 수 있다. 값을 계산해보면 1410이 나오므로 대략 이 샬레안에는 1410개의 Enterococcus faecalis의 군집이 있음을 추측 할 수 있다.
다른 균류도 세어본 결과 에서 Bacillus subtilis 103개, 에서 Escherichia coli 87개 였다. 이 결과를 토대로 원액을 over-ray 하였을 때의 각 균별 군집의 개수를 유추 해 볼 수 있다. Cell counting을 하게 되면 Bacillus subtilis는 에서 103개 이었으므로, 로 계산 할 수 있다. 여기서 2를 곱해주는 이유는 단위가 cfu/ml인데(여기서 cfu는 colony forming unit의 약자)우리는 0.5ml()만큼 넣었기 때문이다. Escherichia coli는 에서 87개 이었으므로, 일 것이다. Enterococcus faecalis는 에서 1410개 이었으므로, 이다.
따라서 원액을 over-lay하면 배지는 어마어마한 숫자의 콜로니가 생성되는 것이다(위의 숫자만큼). 촘촘하게 자라 빈틈조차 없을 것이다. colony forming unit의 뜻 자체가 배양 접시에 펼쳐놓을 경우 군락을 형성할 수 있는 번식 가능한 미생물의 수를 뜻하므로 원액 속에 들어있는 세균의 수는 예를 들어 Bacillus subtilis는 개만큼 있다고 추측할 수 있다. 세균이 colony를 이루어 눈에 보이려면 엄청난 개체의 세균이 자라야 하는 것이지만, 적당히 희석배율이 잘 맞으면 각 colony 하나를 최초 시료의 세균 한 마리로 간주 가능하다는 그런 내용이다. 그리고 Stock의 제작에서 Glycerol을 넣는 이유를 다시 한번 생각해 보았다. 물은 낮은 온도에서 수소결합으로 인해 부피가 커지는 특징이 있다. 따라서 미생물 내부에 있던 물이 부피가 증가해 결정을 형성하고 그 것이 세포를 파괴하는 것이다. 그래서 Glycerol같은 동결보호제를 넣어 주는 것이다.
7. Reference
1. 서적
, 「一般 微生物學 實習」, 大學書林, p.103
집락관찰, 분리배양 유의점
유주현, 변유랑 외, 「응용 미생물학 실험」, 효일, p.61
사면배양법
미생물학 실험교재 편찬위원회, 「미생물학 실험」, 월드 사이언스, p.27
도태배양법, 동물통과법, 사면배양법, 천자배양법, 혐기성세균의 분리 및 배양법
오계현, 강형일, 소재성, 송홍규, 이병욱, 「최신 미생물 실험」, 신광문화사, p.54
배지
2. 인터넷
-http://kcms.daegu.ac.kr/user/sgpark/microbiology/배양멸균.htm , 2012년 4월 1일 참고
세균집락 및 순수배양의 정의
- http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=rustler2&logNo=120011078814 ,
2012년 4월 2일 참고
순수분리 및 배양에 대하여
- http://blog.daum.net/darkmoons/11806299 2012년 4월 2일 참고
접종법 및 각 배지별 발육상에 관하여
- http://blog.naver.com/shalalang_?Redirect=Log&logNo=30086728569 ,
2012년 4월 2일 참고
그람양성 음성 균에 대하여
- http://100.naver.com/ , 2012년 4월 2일 참고
용어 및 용어해설

키워드

공기,   토양,   배양,   미생물,   순수분리,   단일종,   액체배양법,   배지,   그람염색