단백질 overexpression

목차

introduction

result

disccusion

본문내용

만들며 단백질의 경우에는 청자색 또는 적자색을 나타낸다. 이 원리를 이용하여 단백질을 정량한다. 보통 이 방법으로는 1~10mg을 정량할 수 있지만 미량 뷰렛법은 약 0.25~2.0mg까지 정량할 수 있는 감도를 가진다.
착화합물의 색깔은 1~2시간 동안은 안정하지만 그 이상의 시간에서는 점점 색도가 증가한다.
분광학적 정량법
단백질에 있는 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판 잔기들은 각각 275nm와 280nm의 자외선을 흡수한다. 많은 단백질들에 있어서의 이 아미노산들의 합친 수준은 거의 일정하므로 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도와 비례하게 된다. 물론 예외가 있기는 하지만 순수한 단백질의 경우 단백질의 농도가 1mg/ml이고 자외선이 통과하는 경로가 1cm일 때 280nm에서의 흡광도는 1.0이다. 따라서 대부분의 순수한 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도를 측장함으로써 신속히 결정할 수 있다. 이 방법은 정량하는 데 시간이 적게 들 뿐만 아니라 정량하고 난 후의 단백질을 환전히 회수하여 재이용할 수 있는 이점이 있다.
유감스럽게도 자연물들에는 280nm에서 흡광을 나타내는 그밖의 화합물들이 많이 있다. 특히 핵산은 260nm에서 최대 흡수를 가지고 있지만 280nm에서도 흡광도가 상당히 크다. 그러나 A280/A260을 알면 280nm에서의 핵산의 흡광에 대한 보정을 할 수 있다.
7. References
life (생물의 과학) sixth Edition, Purves, Sadava, Orians, Hellerp.p 254~257
http://kin.naver.com/browse

키워드

오페론,   sds-page,   전기영동