본문내용
경도 선택분리배에서의 특수한 성상, 당분해, 용혈 등
2. 순수배양법
분리배양에 이어서 또는 이전에 순수배양하여 얻어진 균을 더욱 증식하여 하나의 균에서 증식된 균집락을 이용하기 위한 배양방법이다. 특히 생화학 시험을 하고자 할 때에는 순수배양이 되어 있지 않으면 혼합된 균에 의한 시험결과를 얻게 되 다른 결과를 얻게 된다
가. 획선배양(streak culture): 사면배지에 배양하기 위한 기술로 화염멸균후 식은 백금루프에 균을 따서 사면아래쪽 응고수에 접촉시키고 한 선을 긋고 지그재그로 그어 도말하고 배양한다.
나. 천자배양법: 고층한천에 배양하는 경우, 백금선 끝에 균을 따서 배지중앙에서 수직으로 천자한다.
다. 액체배양법: 액체배지에서 배양할 때에는 관벽을 이용하여 소량의 균을 배지중에 넣는다. 표면배양의 경우는 균막을 액면에 띄우게 된다.
3. 특수배양법
가. 진탕 및 통기배양(shaking and aeration culture): 액체배지를 이용하여 호기적으로 배양할 때에 진탕하거나 기포를 통과하게 하면, 배지의 교반이 일어나 균의 호소의 접촉이 잘 되어 균발육이 양호하고 균일하게 되므로 생화학적, 유전학적 실험, 파지 실험, 독소생산 등을 위하여 자주 사용된다.
Monod 장치라 부르는 것은 역 T자형 또는 L자형의 Monod 시험관을 이용하여 이것을 좌우로 흔들어 배양하는 것으로 공기와의 접촉면이 크게 되므로 증식이 신속하게 일어나며, 그대로 비탁법에 의하여 균수를 알 수 있어 편리하다.
대량배양을 위해서는 콜벤을 잠기게 한 채 수평으로 진탕할 수 있는 항온수조를 이용한다. 통기배양은 소형 콤푸레사를 이용하여 여과 또는 세기병을 통과한 공기를 배지내에 불어 넣는다. 대량의 배지를 이용하는 배양에는 jar fermenter를 이용한다. 통기, 교반, 항온, pH의 조절 등이 하나의 장치에서 가능한 것으로 수 리터 이상, 공업적인 대형의 것까지 있다.
나. Candle jar method: Neisseria 등의 균은 배양시 환경중의 탄산가스가 10% 정도 함유되어 있는 편이 발육하기 좋다. 이런 환경을 간단하게 만들기 위하여 고안된 방법이다. 밀폐된 초자용기중에 배지와 함께 양초를 넣고 양초에 불을 붙이고 뚜껑을 덮는다. 양초는 자연히 꺼지게 되고 이때 탄산가스는 수 %가 된다.
다. 미호기성배양법: 양초배양법에서는 배양조건의 설정이 엄밀하지 않으므로, O2 5%, CO2 10%, N2 85%의 혼합가스중에서 배양하는 것이 많게 되었다. 방법으로는 압력계와 가스주입구가 부착된 혐기성배양병을 이용하고 상기 혼합가스로 내부공기를 치환하는 방법, 가스발생용 봉지시약을 이용하여 배양병중에서 가스를 발생시키는 방법이 있다. 혐기배양용 키트를 사용할 수 있지만, 이 경우에는 산소흡수용축매를 제거 한다. 또 전용 탄산가스배양용 배양기도 사용된다.
4. Reference
1. Microbialogy an Introduction The Benjamin Cummings Pubishing Company, INC Gerard J. Tortora 외 2 1996 PP142~166
2. 대학미생물학 탐구당 민경희외 2 1988 PP99~120, 60~61, 116~118
3. 최신미생물학 신광문화사 박석기외 5 1995 PP75~97
4. 미생물학 대광문화사 김관수외 7 1994 P244~245
5. 미생물의 생물학 Brook.Madigan 범한 서적 1992 PP 108, 344, 611
6. 최신미생물학 박완숙 외5 정문각 1995 PP 52
7. 최신생화학 김송전 외2 청병문화사 1994 PP 167
8. 최신미생물학실험 신광문화사 박석기외 5 1995 P61~81
2. 순수배양법
분리배양에 이어서 또는 이전에 순수배양하여 얻어진 균을 더욱 증식하여 하나의 균에서 증식된 균집락을 이용하기 위한 배양방법이다. 특히 생화학 시험을 하고자 할 때에는 순수배양이 되어 있지 않으면 혼합된 균에 의한 시험결과를 얻게 되 다른 결과를 얻게 된다
가. 획선배양(streak culture): 사면배지에 배양하기 위한 기술로 화염멸균후 식은 백금루프에 균을 따서 사면아래쪽 응고수에 접촉시키고 한 선을 긋고 지그재그로 그어 도말하고 배양한다.
나. 천자배양법: 고층한천에 배양하는 경우, 백금선 끝에 균을 따서 배지중앙에서 수직으로 천자한다.
다. 액체배양법: 액체배지에서 배양할 때에는 관벽을 이용하여 소량의 균을 배지중에 넣는다. 표면배양의 경우는 균막을 액면에 띄우게 된다.
3. 특수배양법
가. 진탕 및 통기배양(shaking and aeration culture): 액체배지를 이용하여 호기적으로 배양할 때에 진탕하거나 기포를 통과하게 하면, 배지의 교반이 일어나 균의 호소의 접촉이 잘 되어 균발육이 양호하고 균일하게 되므로 생화학적, 유전학적 실험, 파지 실험, 독소생산 등을 위하여 자주 사용된다.
Monod 장치라 부르는 것은 역 T자형 또는 L자형의 Monod 시험관을 이용하여 이것을 좌우로 흔들어 배양하는 것으로 공기와의 접촉면이 크게 되므로 증식이 신속하게 일어나며, 그대로 비탁법에 의하여 균수를 알 수 있어 편리하다.
대량배양을 위해서는 콜벤을 잠기게 한 채 수평으로 진탕할 수 있는 항온수조를 이용한다. 통기배양은 소형 콤푸레사를 이용하여 여과 또는 세기병을 통과한 공기를 배지내에 불어 넣는다. 대량의 배지를 이용하는 배양에는 jar fermenter를 이용한다. 통기, 교반, 항온, pH의 조절 등이 하나의 장치에서 가능한 것으로 수 리터 이상, 공업적인 대형의 것까지 있다.
나. Candle jar method: Neisseria 등의 균은 배양시 환경중의 탄산가스가 10% 정도 함유되어 있는 편이 발육하기 좋다. 이런 환경을 간단하게 만들기 위하여 고안된 방법이다. 밀폐된 초자용기중에 배지와 함께 양초를 넣고 양초에 불을 붙이고 뚜껑을 덮는다. 양초는 자연히 꺼지게 되고 이때 탄산가스는 수 %가 된다.
다. 미호기성배양법: 양초배양법에서는 배양조건의 설정이 엄밀하지 않으므로, O2 5%, CO2 10%, N2 85%의 혼합가스중에서 배양하는 것이 많게 되었다. 방법으로는 압력계와 가스주입구가 부착된 혐기성배양병을 이용하고 상기 혼합가스로 내부공기를 치환하는 방법, 가스발생용 봉지시약을 이용하여 배양병중에서 가스를 발생시키는 방법이 있다. 혐기배양용 키트를 사용할 수 있지만, 이 경우에는 산소흡수용축매를 제거 한다. 또 전용 탄산가스배양용 배양기도 사용된다.
4. Reference
1. Microbialogy an Introduction The Benjamin Cummings Pubishing Company, INC Gerard J. Tortora 외 2 1996 PP142~166
2. 대학미생물학 탐구당 민경희외 2 1988 PP99~120, 60~61, 116~118
3. 최신미생물학 신광문화사 박석기외 5 1995 PP75~97
4. 미생물학 대광문화사 김관수외 7 1994 P244~245
5. 미생물의 생물학 Brook.Madigan 범한 서적 1992 PP 108, 344, 611
6. 최신미생물학 박완숙 외5 정문각 1995 PP 52
7. 최신생화학 김송전 외2 청병문화사 1994 PP 167
8. 최신미생물학실험 신광문화사 박석기외 5 1995 P61~81
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