1차 세포 배양

목차

Culture ?
What kinds of Cells?
Primary culture VS Cell line culture
Classification of tissue culture based on the origin of the cells
Primary cell culture
Steps in primary cell culture
Strategy of primary culture
Source of material
Isolation of tissue
Disaggregation of cells
Explant culture
Enzymatic disaggregation
Enzymes used in enzymatic disaggregation
More rules
Trypsin disaggregation
Other enzymatic procedures
Mechanical disaggregation
Incubation and growth
Substrate for attachment
Culture condition
Separation
Removal of fibroblasts
Basic rules
Safety consideration

본문내용

Culture ?
정의
생체 조직을 생체 밖의 환경에서 어느 일정 기간 생육시키는 기술
목적
생명현상 해명을 위하여 세포, 조직을 독립된 생명체로 인식하고 분자생물학 등의 연구재료로 사용
분류
사용 구조에 따라
기관 배양 (organ culture)
조직 배양 (tissue culture)
세포 배양 (cell culture)
세포 종류에 따라
초대 배양 (primary culture)
세포주 배양 (cell line culture)
What kinds of Cells?
정상 세포
개체로 부터 떨어져 나온 정상 구조와 기능을 가진 수명이 한정된 세포
분열 횟수가 증가함에 따라 노화, 세포의 성질이 시간 경과에 따라 변화
대량 배양 → 동결 보존 → 세포 해동 → 일정한 계대 배양 → 실험에 제공
유한 증식(limited proliferation)
사람 태아 세포라도 50 계대가 한계
접착의존성
일반적으로 세포는 유리 표면에 부착할 수 있는 당단백질성 물질을 생산
불멸화 세포 (immortalized cells)
세포를 어떤 조건하에 배양하면 정상세포도 무한 증식할 수 있는 능력을 지니게 됨 : 불멸화 세포
세포수립주 (cell line) 이라 함
형질전환 세포 (transformed cells)
불멸화 세포에 발암물질 또는 방사선 등을 작용시키면 형태가 암세포와 같이 변화되어 나타나기도 함

키워드

primary culture,   1차 배양,   초대 배양,   세포주,   세포 배양