생명/분생&생화학/서던블랏실험

소개글

생명/분생&생화학/서던블랏실험에 대한 보고서 자료입니다.

목차

Southern의 정의
Southern의 목적
Southern의 원리
Southern과 PCR의 비교
Southern의 응용
실험과정
실험 시 주의 사항

본문내용

Southern의 정의
1975년 E.M Southern에 의해 고안된 방법이다.
Genomic DNA에 존재하는 특정 DNA를 찾기 위해
쓰인다.
그 순서를 간단히 요약하면 다음과 같다.
해석할 DNA를 적당한 restriction enzyme으로 자른다
절단된 DNA를 agarose gel electrophoresis에 의해 분리한다.
변성된 DNA를 nylon membrane 에 흡착시킨다.
방사성 동위원소로 표지된 probe로 hybridization시킨다.
X선 필름에 노출시켜 감광된 band를 확인하여 DNA의 존재를 밝혀낸다.
Southern의 목적
Southern blot analysis를 이용하여 특정 DNA가 한 생물체로 transformation되었는지 확인한다.
Probe를 사용 할 때는 이미 서열을 알고 있는 DNA의 complementary sequence를 이용한다.
이번 실험에서는 T-DNA가 다른 genome에 삽입 되었는지와 몇 copy가 들어갔는지 확인하기 위해 Southern을 사용한다.

키워드

실험,   분자생물학,   생화학,   DNA,   blot