본문내용
유전공학genetic engineering : DNA를 목적에 따라 적절히 조작하여 유전물질을 개조시키는 과정
1. DNA 기법
(1) 제한효소와 점착성 말단
제한효소restriction : 특정 염기서열에서 DNA 분자의 인산 골격을 끊을 수 있는 효소
ex) Eco RI : E. coli에서 처음 분리된 제한효소. 제한자리는 6개의 염기로 구성
5'ㅗㅗㅗGAATTCㅗㅗ3'
3'ㅗㅗCTTAAGㅗㅗㅗ5'
DNA의 절단된 제한절편restriction fragment의 끝은 점착성 말단stcky end이라는 짧고 단일가닥으로 된 꼬리를 갖게된다.
(2) DNA 분자의 잘라잇기와 클로닝 벡터 분자를 외래 DNA 절편을 만들었던 제한효소로 절단 → 벡터 분자와 외래 DNA 혼합
→ 리가아제에 의해 당-인산 골격을 공유결합으로 연결
→ 칼슘으로 처리하여 세포벽의 투과성을 높인 박테리아 세포에 이 플라스미드 DNA를 첨가
→ 도입된 DNA는 박테리아가 세포분열을 할 때마다 함께 복제
1. DNA 기법
(1) 제한효소와 점착성 말단
제한효소restriction : 특정 염기서열에서 DNA 분자의 인산 골격을 끊을 수 있는 효소
ex) Eco RI : E. coli에서 처음 분리된 제한효소. 제한자리는 6개의 염기로 구성
5'ㅗㅗㅗGAATTCㅗㅗ3'
3'ㅗㅗCTTAAGㅗㅗㅗ5'
DNA의 절단된 제한절편restriction fragment의 끝은 점착성 말단stcky end이라는 짧고 단일가닥으로 된 꼬리를 갖게된다.
(2) DNA 분자의 잘라잇기와 클로닝 벡터 분자를 외래 DNA 절편을 만들었던 제한효소로 절단 → 벡터 분자와 외래 DNA 혼합
→ 리가아제에 의해 당-인산 골격을 공유결합으로 연결
→ 칼슘으로 처리하여 세포벽의 투과성을 높인 박테리아 세포에 이 플라스미드 DNA를 첨가
→ 도입된 DNA는 박테리아가 세포분열을 할 때마다 함께 복제
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