조류 내에 존재하는 클로로필 (Chlorophyll-a)의 양을 측정

목차

1. 요약
1.1.1 핵심단어 key-word
1.1.2 실험목적
1.1.3 시료 채취지점

2. 이론
1. 시료의 양(500ml)를 멤브레인과 유리여과지(물결표시가 있는 곳이 여과를 시키는 면)를 이용하여 물속에 있는 클로로필 a를 채취한다.
2. 흡광광도법(Absorptionmetric Analysis)에 관한 일반적인 지식
3. Chlorophyll에 대한 일반적인 지식

3. 실험장치 및 방법
3.1.1 실험방법 순서

4. 실험결과 및 토의
4-1 시료의 성상
4-2 이사천 시료 분석결과 (500㎖)
4-3 클로로필 a 계산 값

본문내용

특징과 더불어 다른 것과 분리할 수 있게 될 수 있다.
-Chlorophyll은 엽록체라는 5μ안팎의 공같은 입자 속에 들어있다.
-일종의 프로필렌 화합물이지만 헤모글로빈(Hb)이 Fe을 함유하고 있는 것에 대하여 Mg이온을 함유하고 있다.
-물에 녹지 않고 알코올, 아세톤, 에테르, 클로로포름에 녹는다.
-어두운 곳에서 자외선을 받으면 녹적색의 형광을 발한다.
-녹색식물의 광합성에 중요한 작용을 하게 되는 데 그것은 빛을 흡수하면 빛의 에너지 를 이용하여 물분자를 파괴시켜 수소와 산소로 분해한다.
실험장치
사용법 및 용도
사진
여과기
글래스제의 흡인병에 흡인 깔대기, 또는 글래스 필터를 취부하여 흡인병 안을 수류펌프(아스피레이터), 그 외의 펌프 등으로 흡인하면서 깔대기 내에 있는 용액을 여과하여, 침전을 깔대기 내에서 분리하는 방법을 말한다. 흡인병 안을 펌프로 감압함으로 인해, 여과 속도를 빠르게 할 수 있다
조직마쇄기(Tissue Grinder)
간단한 세포나 조직의 분쇄에 사용
원심분리기
원심력을 이용하여 성분이나 비중이 다른 물질들을 분리·정제·농축하는 기계. 원심력을 이용하여 균질액을 여러 부분으로 나눌 목적으로 가장 많이 이용되고, 균질액을 시험관에 넣고 원심분리기를 고속으로 회전시키면 입자의 크기와 밀도에 따라 물질을 분리할 수 있다.
마개있는 원심분리관
(15ml, 눈금부)
마개가 있어 밀폐할 수 있는 액체시료를 넣는 기기
광전광도계 또는 광전분광광도계
빛의 양을 전기에너지로 바꾸어서 측광하는 분광광도계를 말한다. 다양한 파장 영역의 빛을 측광하기 위해 각 파장대에 여러 종류의 검출기를 사용.
아세톤
〔acetone,CH₃COCH₃〕
화학식CH₃COCH₃분자량은 58.08으로, 향기가 있는 무색의 액체이다. 물에 잘 녹으며, 유기용매로서 다른 유기물질과도 잘 섞인다. 그래서 물로 세척이 되지 않는 물질을 아세톤으로 처리하면 쉽게 세척할 수 있어 일상 생활에 많이 사용된다. 인화성이 강해 불이 잘 붙으며, 폭발의 위험이 있기 때문에 불에 가까이 두어서는 안 된다.
3. 실험장치 및 방법
회전식진탕기
회전하면서 내부의 내용물이 잘 섞이도록 흔들어주는 기계.
피펫필러(슬라이딩 식)
피펫에 꽂아 계량할 때 사용되며 정밀 계측이 요구될 때 사용.
막여과기 (Membrane filter)
세균이나 효모 정도 크기의 입자를 구별하는 막여과 과정에 사용되는 필터
GF/C
Borosilicate로 제작된 EPA규격에 적합한 현재 가장 많이 사용되고 있는 여과지.
일반적인 수질오염 분석에 사용.
3.1.1 실험방법 순서
1. 두 개의 마개가 있는 원심 분리관을 준비한다.
2. 두 개의 메스실린더에 채수해 온 이사천 물을 500ml씩 붓는다.
3. 여과기에 GF/C와 mem brane filter를 넣고 각각의 500ml 물을 여과한다.
4. 먼저 여과된 GF/C를 핀셋으로 얇게 말아 접어서 원심분리관에 넣고 아세톤 10ml를 넣는다.
5. 원심분리관의 마개를 닫고 회전식 진탕기에 회전시킨다.
6. Membrane filter도 GF/C와 같은 방법을 반복한다.
7. 원심분리관을 거치대에 꽂고 호일로 싸서 하룻밤동안 4˚C(암냉실)로 보관한다.
8. 좌우 균형을 맞추기 위해 원심분리관을 꽂은 상태에서
우리의 시료가 든 원심분리관을 꽂고 3000RPM 으로 원심분리 한다.
9. 스포이드로 상등액을 채취해서 조직마쇄기에 넣은 후 흡광도를 663nm,645nm,630nm,750nm에서 측정한다.
4. 실험결과 및 토의
4-1 시료의 성상
분류
내용
시료채취 일자-일시
2011년 10월 4일
시료채취 장소
이사천
시료의 외관
외관으론 깨끗함.
여과 시료량
0.5L (500㎖)
상등액량
10.㎖
4-2 이사천 시료 분석결과 (500㎖)
630nm
645nm
663nm
750nm
Menbrane filter
0.111
0.590
4.000
0.113
GF/C
0.090
0.429
1.884
0.097
4-3 클로로필 a 계산 값
클로로필 a(㎎/㎥) =
여기서 Y는 chlo-a 의 양(ug/㎖)
Menbrane filter
= 3.887
= 0.477
= -0.002
= (11.64×3.887)-(2.16×0.477)+(0.1×-0.002) = 44.12
Chlorophyll a (mg/m3) =
=
GF/C
= 1.787
= 0.332
= -0.007
= (11.64×1.787)-(2.16×0.332)+(0.1×-0.007) = 20.08
Chlorophyll a (mg/m3) =
=
보통 플랭크톤의 조류에서 발견되는 클로로필은 클로로필 a, b, c, d이다. 이중에서 클로로필 a는 모든 광합성생물에, b는 고등식물과 녹조류에, c는 규조류와 와편조류 등에 포함되어 있으므로 각각의 양을 측정하여 식물플랑크톤의 대략 그 현존량을 알 수 있다.
이번실험은 아세톤 용액으로 클로로필 색소를 추출하여 추출액의 흡광도를
663㎚, 645㎚, 630㎚, 750㎚ 에서 측정하여 클로로필 a량을 계산하는 실험으로
클로로필 실험의 계산식의 X1=콜로로필 a, X2=클로로필 b, X3=클로로필 c 를 나타내고 이 값들을 계산해서 나온 Y값은 클로로필 a의 양을 나타낸다
구해진 Y값으로 계산식을 이용해 실험에 쓰여진 시료 중의 클로로필 a의 양을 구하는 방식으로 값을 GF/C와 Menbrane filter를 사용하여 두 번의 실험 결과 값을 구하였다.
그 결과 GF/C에서는 클로로필 a(㎎/㎥) = 20.08×10(㎖) / 0.5(l) = 401.6㎎/㎥ 가 검출되었고, Menbrane filter에서는 클로로필 a(㎎/㎥) = 44.12×10(㎖) / 0.5(l) = 882.4㎎/㎥ 검출 되었다.
우리가 담당한 이사천의 수질상태를 알아보기 위해 클로로필에 대한 하천 수질 환경 기준을 찾던 중, 하천은 자연폭기되며 계속 흐르다보니 녹조발생이 드물게 발생되므로, 적조 녹조에 관련된 T-N , T-P , 클로로필-a등의 기준이 제외되었다는 사실을 알았고 , 앞으로의 4대강 사업 이 계속 진행 되면서 생기는 문제들을 해결하기 위해서라도 클로로필에 대한 기준이 생겨야 된다고 생각한다.

키워드

조류 ,   클로로필,   Chlorophyll-a,   양을 측정