목차
형질전환이란 외부 DNA를 반응능이 있는 세포(competent cell)에 넣는 것
반응능이 있는 세포(Competent cell)
Competent cell의 제조방법
DH5α
<Transformation 실험 방법>
반응능이 있는 세포(Competent cell)
Competent cell의 제조방법
DH5α
<Transformation 실험 방법>
본문내용
llin) plate-저항성을 지니는 항생제를 포함하는 고체배 지-에 위의 혼합액을 적당량 pipette으로 떨어뜨린 후, Spreader로 골고루 도말하여 준다.
1) 과정 5까지 끝낸 균 용액을 3000 rpm에서 3-5분간 원심 분리한다. (균을 down시킨다.)
2) 상층액을 크게 버린다.
3) 나머지로 균 pellet을 풀어, 이를 plate에 도말한다.
그러나, plamid DNA를 형질전환 할 경우에는 혼합액의 10%정도로 Spreading하도록 한다.>
7. 37°C 배양기에서 plate를 뒤집어서 밤새 배양한다. 12∼16시간 정도 배양하면 colony를 관 찰할 수 있다.
8. 고체배지 상에서 자란 colony를 따서 액체배지에 키운(Inoculation) 후, Plasmid DNA 뽑아 Ligation이 제대로 되었는지 Enzyme cutting을 통해 확인한다.
2) 상층액을 크게 버린다.
3) 나머지로 균 pellet을 풀어, 이를 plate에 도말한다.
그러나, plamid DNA를 형질전환 할 경우에는 혼합액의 10%정도로 Spreading하도록 한다.>
7. 37°C 배양기에서 plate를 뒤집어서 밤새 배양한다. 12∼16시간 정도 배양하면 colony를 관 찰할 수 있다.
8. 고체배지 상에서 자란 colony를 따서 액체배지에 키운(Inoculation) 후, Plasmid DNA 뽑아 Ligation이 제대로 되었는지 Enzyme cutting을 통해 확인한다.
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