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단백질의 염색
⑤ Purification of hTrx1 (hTrx1 정제)
5. Materials & Apparatus
※ 5x Protein sample buffer의 조성 및 역할
※ 원심분리기 (centrifuge)
※ Coomassie brilliant blue(CBB) 염색
6. Methods
※ 주의사항
7. Results
8. Discussion
9. Ref
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계산하는 방법이다. 최소자승법으로 미지용액의 농도를 구 할 수 있다.
7.참고문헌
영양생화학 실험 ( 신광출판사. 이양자에 4. 2004년도) 1.실험목적
2.이론적배경
3.시약및기구
4.실험방법
5.실험결과
6.고찰
7.참고문헌
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크로마토그래피 (Chromatography)
② Ion-exchange chromatography
③ 단백질 정량법 (Bradford assay)
5. Materials & Apparatus
※ Coomassie Blue G dye
※ BSA(bovine serum albumin)
6. Methods
※ 주의사항
7. Results
8. Discussion
9. Reference
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분획
3). 단백질의 가용화 법(막단밸질의 가용화 방법)
4). 단밸질 정량법(Bradford 법)
5). Polyacrylamide gel
(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis;SDS-PAGE)
6). 단백질의 염색
4. Procedure
5. Content of solutions & 그 용도
6. 실습 결과
7. Discusstion
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단백질도 측정할 수 있다. 측정범위는 0.01-1.0이다.
3) UV spectrophotometry
UV에 의한 정량법은 단백질이 단백질 내의 티록신과 트립토판의 페놀과 indolic group에 의해 280㎚에서 UV를 흡광하는 성질을 이용하는 방법이다. 정확한 양을 알기보다는 존재
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protein + Cu2+ + OH- → Cu+
Cu+ + 2BCA → Cu+/BCA chromophore(562nm)
이 방법은 Lowry법과 비교해서 방해물질 특히 계면활성제의 영향을 받지 않고 생성물이 안정하다. 그러나 이 방법의 단점은 반응이 느리고 단백질이 변성된다는 것이다. 감도는0.5μg/ml정도
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방법)과 BCA시약은 발색반응을 위해 cupric ion에서 cupurous ion으로 환원반응이 일어 나야 한다. 이들시약은 단백질 양에 비례하여 형성된 cupurousion과 단백질의 복합체를 형성하고 그 발색정도가 단백질 농도에 비례하여 정량이 가능하다. 이들 구
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단백질함량과 거의 비슷하다는 것에서 신기하게 느껴졌다. 식품중의 단백질의 함량을 측정하는 방법을 배우게 되어서 다른 식품들도 한번 직접 단백질의 함량을 구해보고 싶다.
5. 출처
1. 한국 생화학회, 1997, 실험생화학, 탐구당 p. 53-72, p. 17
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단백질이 들어 있는 것입니다.
그 밖의 반응방법
단백질 + 아세트산 납 ―――→ PbS 검은색 앙금 ::황반응
kjeldahl법
단백질내의 질소함량을 기준으로 질소 함량을 정량으로 하여 단백질을 구하는 방법
phenol법
folin시약을 이용한 정량법
자외
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만들며 단백질의 경우에는 청자색 또는 적자색을 나타낸다. 이 원리를 이용하여 단백질을 정량한다. 보통 이 방법으로는 1~10mg을 정량할 수 있지만 미량 뷰렛법은 약 0.25~2.0mg까지 정량할 수 있는 감도를 가진다.
착화합물의 색깔은 1~2시간 동
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