생물학 실험 - 색소분리 실험

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하나가 들뜬 상태로 올라가게 된다. 이 과정을 거쳐서 반응 중심 색소에 전자가 들뜨게 되고 이 들뜬 전자가 1차 수용체로 들어가면서 명반응이 진행되게 된다. 반응 중심 엽록소가 흡수하는 파장대가 길수록 주변의 모든 에너지를 전달 받을 수 있고 전자를 계속 들뜨게 하여 명반응이 원활히 일어나게 된다.
시금치의 엽록소a와 엽록소b중에서 더 긴 파장 빛을 흡수하는 것이 엽록소 a이기 때문에 반응중심은 엽록소a이다. 이러한 반응중심복합체에 있는 엽록소 a분자쌍은 다른 분자들이 빛으로부터 얻은 에너지를 이용해 자신의 전자 중 하나를 고에너지 상태로 들뜨게 하고 1차 전자수용체로 전자를 전달할 수 있게 한다.
④ 엽록소 추출 시 수용성 buffer용액 대신 acetone을 사용한 이유는 무엇일까?
엽록소에 에스테르기와 케톤기가 존재한다고 하더라도 탄소사슬이 대부분을 이루고 있다. 즉, 극성보다는 무극성에 더 가깝다. 그렇기 때문에 극성인 수용성 buffer용액보다는 acetone에 더 잘 녹게 된다. 그러므로 acetone을 사용한 것이다.
⑤ 실험에 대한 comment.
크로마토그래피에서 분리된 색소의 종류와 순서는 같았지만 의 값은 두 실험의 경우 달랐다. 그래도 두 번 다 수치가 그렇게 다르지는 않아서 재현성은 확인할 수 있었다. 실제로 알려진 값을 보고 비교하니 우리의 실험 결과 값들은 다 원래 값보다 컸다. 그 이유는 우리가 눈으로만 대충 용매의 전개도와 용질의 전개도를 살필 수밖에 없었기 때문에 나온 한계였다. 조교님의 말씀대로 우리는 용매의 전개도와 카로틴의 전개도를 거의 같다고 생각하여 카로틴의 값이 0.9후반이 나왔다. 하지만 실제로는 0.8대였다. 얇은 층 크로마토그래피를 이용하였더라면 더욱 효과적인 색소 분리를 할 수 있지 않았나 싶다.
그리고 우리조는 실수로 아세톤의 양을 좀 과하게 써서 그런지 너무 농도가 묽게 나왔을 까봐 걱정했다. 조교님도 걱정하셨다. 그런데 다행히도 이쑤시개로 잘 찍어서 크로마토그래피가 비교적 깨끗하게 분리되었던 것 같다. 그리고 분광광도계에 넣은 e-tube에 4가지 물질을 같은 농도로 넣지 못한 것이 조금 아쉽다. 다름 정교하게 1ml로 맞추려고 했는데 어느 한 e-tube에는 1ml보다 조금 더 많이 들어있었다.
이번 실험에서는 오직 시금치로만 크로마토그래피를 전개했다. 실제로 토마토나 당근의 경우에는 -카로틴 등 녹색계열의 색소가 아닌 색소들이 다수 있을 것 같다. 다른 식물들 가지고도 해보면 흥미로웠을 것이다. 시간과 재료가 부족해서 아쉬웠다.
깨끗이 분리된 색소에 대해 spectrophotometer를 실행했지만 그 양이 매우 적어 흡광도 또한 원하는 만큼 눈에 띠게 큰 차이를 보여주지 않았다. 한 사람의 색소가 아닌 여러 사람의 색소를 추출하여 색소의 양을 늘려 spectrophotometer를 찍었으면 더 확실한 그래프를 얻을 수 있었을 것이다.
5. References
1] 서울대학교 생명과학부 교양실험게시판핸드아웃
2] Campell 외 6명. 전상학(역). 2008. 생명과학. 8e. 바이오사이언스. p.192~193
3] Oxtoby 외 2명. 2003. 현대일반화학. 5e. 자유아카데미. pp.386~387
4] Oxtoby 외 2명. 2003. 현대일반화학. 5e. 자유아카데미. pp.764~765
5] Wikipedia 백과, http://en.wikipedia.org/wiki/Carotenoid
6] Wikipedia 백과, http://en.wikipedia.org/wiki/xanthophyll
6] Wikipedia 백과, http://en.wikipedia.org/wiki/carotene

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