영양생화학실험A+) HPLC 크로마토그래피 카페인 정량

소개글

영양생화학실험A+) HPLC 크로마토그래피 카페인 정량에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

식품 기기 분석 실험 보고서
1.
주제 1) HPLC (high performance liquid chromatography) : 커피, 홍차, 녹차의 caffeine 분석
2) GC (gas chromatography) : 오렌지의 리모넨 성분 분석
2.
재료 및
기구 HPLC, 카페인 표준품, methanol, D.W, micropipette, 10ml volumetri flask, C18 카트리지, Adapter, 3ml 주사기, syringe filter
3.
실험 목적
및
원리 목적 1) HPLC로 음료(커피, 홍차, 녹차)의 caffeine을 정량할 수 있다.
2) GC로 오렌지 껍질의 향기성분을 분석할 수 있다.
원리 HPLC의 작동원리는 일반적인 크로마토그래피와 매우 유사하다. 액체상태의 분석체는 칼럼 내의 정지상을 통과할 때 여러 물리화학적 친화도에 따라 머무르는 시간이 상이하고 이를 이용하여 분리하는 원리이다.
LC의 칼럼은 충전식 칼럼이 대부분이며 고형의 중심체에 여러 정지상들이 코팅되어 있는 형식을 취한다.



4.
실험
방법
1) 표준용액 만들기
① 카페인 표준품 10mg을 100ml 부피플라스크에 넣고 전체 부피가 100ml가 되도록 30% 메탄올 수용액으로 묽힌다. ( 농도: 100ppm)
② 마이크로피펫 ①의 용액 200, 400, 600, 800ul와 30% 메탄올 수용액 800, 600, 400, 200ul를 각각 혼합하여 전체 부피가 1ml가 되도록 한다.
(농도: 20, 40, 60, 80 ppm)
③ Calibration curve를 작성한다.

2) 시료용액 만들기
① 50ml Beaker에 음료(커피,홍차,녹차)를 취한다.
② 메탄올 25ml와 d.w 25ml l를 섞어 50%의 메탄올을 제조한다.
③ 음료 2ml를 메탄올과 초순수로 활성화시킨 C18 카트리지에 흡착시킨다.
④ d.w 5ml로 세척하여 카페인 외의 불순물을 흘려보낸다.
⑤ 10ml 부피 플라스크에 C18 카트리지를 대고 50% 메탄올 수용액 5ml를 흘려넣어 용출(caffeine)한다.
⑥ 10ml 부피 플라스크의 표시선까지 초순수를 넣어 전체 부피가 10ml가 되도록 묽힌다.
⑦ 시료 용액을 균질화 시킨다.
⑧ 추출 시료를 바이알의 절반 정도까지 취하여, HPCL 기기에 바이알을 꽂는다.

키워드

HPCL,   크로마토그래피,   카페인 추출,   식품 기기 분석 실험 보고서,   1) HPLC (high performance liquid chromatography),   2) GC (gas chromatography),   크로마토그래피