E.coli배양 (예비보고서)

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E.coli배양 (예비보고서)에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

100ml + Agar 1.5g 을 넣는다.
2. Autoclave 한다.
3. 약 60℃까지 기다린다.
4. Amp 100μl 를 넣는다.
5. 흔든 후에 plate에 약 20ml씩 담는다.
(알콜램프 옆에서 plate는 회전시키면서 도말봉은 왕복운동을 한다.
손에 힘을 주어 누르지 않고 액체가 끈적해질 때까지 spread 한다.
유리막대는 알코올을 묻혀 알코올램프로 불로 소독한 후 식혀서 사용한다.)
4. 37 ℃ incubator에서 plate를 뒤집어서 12~14 hr 배양한다.
(overnight, 15hr 넘지 않게 한다.)
5. 실험한 다음날 오전에 와서 cell을 확인하고 잘 생긴 것은 parafilm으로 plate 옆을 감싼 후 뒤집어 냉장 보관한다.
★ 유의시항★
1. Competent cell(JM109 또는 DH 5α)는 -80℃ 냉동고(복도에 있음)에 보관되어 있다.
2. Plasmid(HSP)는 426호 냉동고에 있다.
3. Amp는 412호, 426호 냉동고에 보관되어 있다.
4. Ice bath용 얼음은 410호 뒤편에 있다.
5. Transformation할 때 42℃ water bath는 426호 것을 사용하고 실험시간 전에 미리 켜둔다.
6. Colony와 고체배지는 앞 분반이나 앞 조에서 잘 배양된 것을 따로 냉장고에 보관해둔 후 뒷분반이나 다음 조에
서 사용할 수 있게 한다. 그리고 액체배지는 만들어서 식힌 후 바로 사용한다.
7. Autoclave하는 중간에 꼭 transformation을 한다.
8. 결과 작성은 실험한 다음날 사진 찍거나 그림을 그려서 붙인다.

키워드

E.coli,   배양,   예비보고서,   실험 보고서