Plasmid의특징및분리

목차

1. Plasmid의 특징

2. 대장균으로부터 Plasmid의 분리

본문내용

원심분리 한다.
→ 남아있는 Phenol과 단백질 찌꺼기를 제거하는 과정
7) 원심분리한 것을 상층액만 따서 새 튜브에 옮긴다. 여기에 2배 부피의 ethanol을 넣고 잘 섞은 후, 냉동실에 잠시 넣어둔다.
→ Ethanol은 DNA 주위의 수분을 제거하여 DNA끼리 뭉치게 한다.
8) 냉동실에 있던 튜브를 꺼내 원심분리 하여, 상층액을 조심스럽게 따라낸다.
9) 여기에 70% ethanol을 넣고 다시 원심분리 한다.
→ 이 단계는 남아있는 염을 제거한다.
10) 조심스럽게 상층액을 따라내고, DNA 침전물을 진공으로 말린다.
11) 여기에 멸균한 증류수나 TE (Tris-EDTA) buffer를 넣어 DNA를 녹인다.
12) 녹인 DNA를 아가로스겔 전기영동을 실시하여 관찰한다.

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