전기영동법에 대해서

목차

1.전기 영동법의 원리
2. 전기영동법의 종류
* DNA(or RNA) 전기영동
* 단백질 전기영동

본문내용

의한 분리 두가지가 있다. 젤은 acrylamide라는 물질로만 전기영동시 밴드가 끌려나오는 것은 다음과 같은 조건도 검토해볼 필요가 있다.
1. DNA가 완전하게 절단되었는지 확인하여야 한다. digestion후에 소량을 전기영동하여 전체적으로 고르게 깨끗한 전기영동 패턴을 확인해야 한다. 자주 사용하는 6염기 인식 제한효소로 genomic DNA를 절단하면 평균 길이가 수백base pair에서 수십 kilo base pair가 된다. 따라서 효소의 종류에 의해 전기영동 패턴이 다르다.
2. 전기영동 조건이 밴드를 좌우 한다. 우선 순도가 높은 전기영동 버퍼를 이용하고, 전기영동에 로딩 하는 DNA양이 적당해야 한다. 너무 많은 경우에는 정상적으로 분리가 일어나지 않아 위쪽에 뭉쳐있거나 전체적으로 끌리고 밴드가 휘는 경우가 있다. 통상의 genomic southern에 사용하는 양은 DNA의 종류나 효소의 종류, 사용하는 프로브의 감도에 따라 다르겠으나 5-15 마이크로그램이 적당한데 단, 10마이크로그램보다 많으면 전기영동 조건을 아주 느리게 하는 것이 좋다. 전기영동 조건이 빠르면 작은 밴드는 그런대로 분리될 수 있으나 15kb이상의 밴드는 분리되지 않는 경우가 많고 뭉쳐버리거나 끌려 버리기 쉽고. genomic southern의 밴드를 깨끗하게 얻기 위해서는 전기영동 전압을 0.5-1Volt/전극간거리 cm로 하여 긴 시간(12시간 정도) 실시하는 것이 바람직하다.
reference: http://blog.naver.com/raisonance
http://bioaio.com.ne.kr/ep.hwp

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