[생화학실험] Methods of protein estimation(Lowry, Bredford, BCA 에 대하여)

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목차

Ⅰ. 서론

Ⅱ. 본론
1. Lowry method
- 원리
- 시약 및 기재
- 방법
- 다른 method와의 차이점
- 참고) 뷰렛 시험 (biuret test)
2. Bredford method
- 시약 및 재료
- 방법
- 다른 method와의 차이점
3. BCA method
- 방법
- 다른 method와의 차이점

* 참고문헌

본문내용

1. Lowry method
- 원리
모두 구리이온(cupric ion-Cu2+ 과 cupurous ion- Cu+)을 이용하는 방법이다. Folin 시약(Lowry 방법)과 BCA시약은 발색반응을 위해 cupric ion에서 cupurous ion으로 환원반응이 일어 나야 한다. 이들시약은 단백질 양에 비례하여 형성된 cupurousion과 단백질의 복합체를 형성하고 그 발색정도가 단백질 농도에 비례하여 정량이 가능하다. 이들 구리이온의 화학변화에 영향을 주는 화합물이 검체에 존재할 경우 단백질 정량을 간섭하게 되는데 이들은 분석을 실시하기 전에 제거하거나 영향을 주지 않을 정도로 희석하여 분석을 실시한다. Lowry 방법은 전통적으로 간섭인자가 많은 것으로 알려져 있었다. 완충액의 조성인 NaCl과 potassium phosphate, sodium phosphate, Tris(2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol, C4H11NO3), sodium citrate, sucrose 등의 화합물들이 반응에 간섭하는 대표적인 인자들이었다. 이런 간섭을 줄이거나 없애기 위해 전처리를 필요로 한다.

키워드

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