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DNA polymerase Ⅰ은 5‘->3’ exonuclease로 RNA Primer를 제거하고 제거된 부분은 새로 DNA를 합성하여 대치시킨다.
DNA ligase는 새로 합성된 DNA간 phosphodiester bond를 연결한다.
ligase는 주로 lagging strand에서 활성이 높다.
⑦ DNA 교정
합성도중 잘못된 염기
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DNA나 RNA보다 많은 빛을 흡수하고, 단일가닥의 DNA나 RNA는 이중가닥의 DNA보다 많은 양의 빛을 흡수한다. 이중가닥 DNA의 A260=1.00 이고, 단일가닥 DNA의 A260=1.37 이고, 유리 염기의 A260=1.60 임을 보면 알 수 있다.
5)Cell lysis (CW, CM파괴)
물리적 방법과
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가지 sample을 0.5 ml PCR tube에 준비한다.
- 각 tube에 PCR program[94℃ 2분, (94℃ 30초, 55℃30초, 72℃ 30초: 5 cycle), (94℃ 30초, 60℃ 30초, 72℃ 30초 : 20 cycle), 72℃ 5분]에 의한 PCR을 진행한다.
- 전기영동으로 결과를 확인한다.
Results
↑ Chromosomal DNA isolation of
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경과할 수 있다.
용원성 생활환이란 파지의 DNA가 기주세균의 염색체에 삽입되어 기주염색체와 함께 복제되는 과정을 밟게 되는 것을 말한다. 이 용원성 파지가 자외선 조사 등 유발 조건이 있으면 다시 용균성 생활환을 가지게 된다. 이 때
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DNA→대장균에 주입→대량생산
④최근에, 백신용 항원분자의 생산도 활발하게 연구되고 있음.
(특히, B형 간염 백신의 생산)
⑤1991년, KIST 유전공학 연구소에서, 사람의 유전자 (interleukin-6)를 담배에 도입(성공)
(2)품종개량
①육종(breeding) :
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