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생물학 실험 예비보고서 - PCR을 이용한 유전자 증폭
1. 실험제목 : PCR을 이용한 유전자 증폭
2. 실험일자
3. 실험목적
4. 실험기구 및 시약
5. 실험이론
-PCR이란?
-PCR증폭효율에 영향을 미치는 요인
-중합효소 연쇄반응은 다수의 DNA 서
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간에 25회로를 돌려 DNA를 105배로 증폭할 수 있다.
6. 실험방법
1) 미리 10X Buffer와 dNTP, primer, template를 서서히 녹인다.
2) 실험에 이용할 PCR 시험관에 다음과 같이 실험에 사용할 재료들을 혼합하고 pipette으로 잘 섞는다.
※ Template은 지난주에 추
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PCR 과정에서 template에 붙지 않으며, PCR과정이 끝난 후에 polymerase(polI or Klenow fragment)에 의해 restriction site에 있는 nick이 채워진다.(※ primer는 template에 상보적으로 결합해야 한다. 또한 각각 DNA의 다른 strand에 결합한다.)
* upstream primer
5' - GAATTCTTTTT
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유전자의 염기서열을 체계적으로 변화시킬 수 있게 해준다.
- PCR-based mutagenesis: PCR은 체외 돌연변이법에도 매우 유용하다.
- 돌연변이용 시발물질(mutant primer)에는 증폭하고자 하는 유전자의 특정 염기서열을 변화시키도록 변경된 염기서열이
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바나나, 브로콜리 DNA 추출 실험에서 DNA 손상으로 인한 한계를 느낌.
이에, PCR과 Cloning, 전기영동 실험을 계획.
블로팅과 유전자치료에 관심을 가지게 됨.
배경지식(
플라스미드란?
벡터란?
왜 플라스미드를 벡터로 가장 많이 이용하는
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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Spectrometry): 대사산물 분석
- UV-Vis Spectrophotometer: 미생물 성장 및 발효 산물 측정
2. 분자생물학 및 유전체 분석 기술
- qPCR 및 RT-PCR: 유전자 발현 분석
- CRISPR-Cas9: 미생물 유전자 편집
- NGS (Next-Generation Sequencing) 데이터 분석: 미생물 유전체 분
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1.경력(대학생활 또는 직장활동 상황)
대학생 시절, 다양한 실험 및 연구 프로젝트에 참여하며 학문적 기초를 다졌습니다. 특히, 세포배양, 유전자 클로닝, PCR 분석 등을 포함한 실험실 경험을 통해 연구의 기초를 배우고, 실험을 설계하고 결
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유전자 발현 데이터
- 실험을 통해 얻은 세포 실험 데이터(qRT-PCR, Western blot, ChIP 등)
- RNA sequencing을 통한 전사체 분석 결과
이러한 데이터를 종합적으로 분석하여 전사 인자의 기능과 유전자 조절 네트워크를 규명하고자 합니다.
4) 연구 기대
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PCR 실험 등을 했습니다. Cas 9 벡터를 이용한 유전자 교정 벼의 변이집단 구축과 어린 벼의 형질전환 과정을 실험했으며
⑨지원동기 및 장래계획
? 지원동기
세계는 빠르게 변하고 제 5의 물결이 오고 있는 시대이지만 언제나 이 모든 것들은
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유전자 조작 기술을 도입하는 것에 대해 어떻게 생각하나요?
Part 2. 공통 인성 질문 총정리
1. 학생에 대한 자기소개를 해주세요
2. 우리 학교에 지원한 이유는 무엇인가요?
3. 갈등을 중재하여 문제를 해결한 경험이 있나요? 그 경험을 통해
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