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5ml를 흘려넣어 용출(caffeine)한다.
⑥ 10ml 부피 플라스크의 표시선까지 초순수를 넣어 전체 부피가 10ml가 되도록 묽힌다.
⑦ 시료 용액을 균질화 시킨다.
⑧ 추출 시료를 바이알의 절반 정도까지 취하여, HPCL 기기에 바이알을 꽂는다.
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HPCL 기기에 바이알을 꽂는다.
3) HPLC 분석 조건
표준용액과 시료용액 1ml를 0.2um syringe filter로 여과하여 다음과 같은 조건으로 분석
Condition
Column
Detector
Mobil phase
Flow rate
Injection volume Zorbax Eclipse XDB-C18 (3.0 x 100mm, 3.5um)
UV 280nm
Methanol :
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커피속에 카페인의 질량은 0.00015molx194 = 29.1mg이다.
동결건조 커피 700mg안에 카페인이 29.1mg이 있으면 카페인의 무게 퍼센트는
2.91mg/700mg x 100% = 4.15%이다.
실험을 하면서 카페인의 흡광도값이 예상되는 데이터나 다른조데이터보다 낮게 나와서
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