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(1) MTT 시약을 이용하는 Tetrazolium assay는 노란색의 수용성 MTT tetrazolium을 세포에 처리하면, 살아있는(metabolism이 온전한) 세포의 미토콘드라이에 있는 탈수소효소에 의해 tetrazolium의 ring structure 끊어지면서 청자색을 띄는 비수용성 MTT formazan 결정
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I. 실험 목표
MTT assay는 세포의 증식능을 분석하는 실험 기법으로, 세포의 대사에 관여하는 미토콘드리아 내 NADH-dependent cellular oxidoreductase enzyme을 통해 MTT가 formazan으로 환원되는 원리를 이 용한다. 해당 실험은 배양한 세포 수를 직접 계산한
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MTT Assay
: MTT assay는 탈수소 효소작용에 의하여 노란색의 수용성 기질인 MTT tetrazolium을 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyl-tetrazolium bromide)으로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법이다. 여기
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값이 각기 다른 것을 보았을 때, 처음부터 완벽하게 동량으로 넣은 것이 아니라는 것을 알 수가 있다.
세 번째로, control과 나머지 4개의 농도의 OD값을 비교해보면 OD값이 가장 높아야 하는 control이 12.5μM 농도의 시약을 처리한 것의 OD값보다 낮
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시험범위
• P82: 세포증식곡선-증식곡선, MTT(MTS) assay
• P140: 유전자도입 -Transfection
• P125: GFP 가시화 기술을 이용하나 organelle의
동태관찰 (Reporter gene)
• 유전자발현억제-Antisense법(P182), RNAi(P186)
• 유전자발현분석
N
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