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refractive index(굴절률)을 맞추기 용이하도록 하여, image의 clarity와 quality를 향상시킨다. 1. limit of resolution 계산방법
2. 1) Cy5
2) GFP(green fluorescent protein)
3) ReAsH
3. 4% Para-formaldehyde의 기능
4. blocking solution의 기능
5. mounting solution의 기능
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Blocking solution
-blocking이 필요한 이유
-BSA와 skim milk의 차이점
5) Antibody
-antibody란 무엇인가
-antibody의 상업적 용도
II. Materials & Methods
1)실험재료
2)SDS gel running의 방법 및 과정
3)transfer의 방법 및 과정
4)destaining과 blocking과정
5)primary antibody
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blocking solution(skim milk)에 희석하여 membrane에 처리한 후 1차 항체를 인지하는 2차 항체(anti-rabbit antibody)도 blocking solution에 희석하여 membrane에 처리한다. 이때 blocking solution은 background를 방지해주는 역할을 한다. 1차 항체는 목표 단백질을 인식하여
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blocking solution(0.1% BSA-PBS)을 well당 100ul씩 분주하였다. 이것을 4 에서 30-60min간 정치시켰다. 상등액을 제거하고 PBS로 3회 washing 하였다. Primary antibody를 0.05 Tween 20+PBST로 희석시킨 후, well당 50ul씩 분주하고 상온에서 30min간 정치하였다. 다시 PBS로 3
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solution, PBST, developer solution, fixer solution, blocking buffer (skim milk 5% in PBST), trasfer buffer
3.
실험 목적
및
원리 목적 SDS-PAGE 에 의한 단백질 분리 및 Western blot
원리
1) SDS – PAGE (Sodium dodecylsulfate – Polyacylamide Gel Electrophoresis)
SDS-PAGE는
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