Gram-Staining

목차

1. 서론

2. 본론
1)이론적 배경
(1)원핵세포의 세포벽
(2)그램 양성균
(3)그램 음성균

3. 실험기구 및 시약

4. 실험방법

5. 실험결과
1)그램 양성균
2)그램 음성균

6. 결론

7. Reference

본문내용

ony를 원을 그리듯이 문질러 slide에 퍼지도록 한다.
4) 세균이 슬라이드 글라스 위에 고정되는 것을 돕기 위해 물이 완전히 제거되도 록 슬라이드를 Bunsen burner로 가열시켜준다. 이때 열에 의해 slide가 깨지지 않도록 주의한다.
5) crystal violet으로 준비된 표본을 약 60초간 염색한다.
6) 염색된 미생물을 증류수로 헹구어주고 마를 때까지 기다린다.
7) iodine을 crystal violet로 1차 염색된 표본에 흘리며 염색을 고정시킨다.
8) 증류수로 깨끗이 헹구어주고 완전히 마를 때까지 기다린다.
9) Decolorizer를 충분히 흘려주어 염색된 표본을 탈색한다. 이때 Decolorizer가 슬라이드 위에서 완전히 제거될 수 있도록 슬라이드를 기울여준다.
10) Safranin으로 1차염색 및 탈색과정을 거친 표본을 2차 염색한다.
11) 증류수로 깨끗이 헹구어주고 완전히 마를 때까지 기다린다.
12) gram positive bacteria와 gram negative bacteria의 색깔변화 관찰한다.
Ⅴ. 실험결과
1. Gram Positive
figure4. Gram Positive
2. Gram Negative
figure5. Gram Negative
Ⅵ. 결론
그램 양성균과 음성균의 염색차이 요인을 알아보면 지금까지 알려진 바로는 그람양성균의 CV-I 복합체가 탈색되지 않는 이유가 다음과 같다. 즉, 탈색제로 사용되는 알코올이 여러 층의 펩티도글리칸을 탈수시켜 분자간의 공간을 좁히기 때문에 V-I 복합체가 세포 밖으로 빠져 나오지 못하는 것이다. 따라서 자주색이 그대로 남는다. 그러나 그램 음성균의 경우 대부분 인지질로 구성된 외막과 세포막(cytoplasmic membrane)이 알코올에 쉽게 용해되며, 한 겹의 얇은 펩티도글리칸 층은 CV-I 복합체를 막기 곤란하기 때문에 쉽게 탈색된다. 이처럼 그램 양성균과 음성균의 차이는 세포벽 구조에 따른 차이로 인해 구별되며 어떤 경우에는 그 차이가 불명확하여 그램 양성균이 그램 음성균으로 염색되기도 한다.
이번실험은 세포벽의 두께차이로 염색결과가 달라지는 것을 알아보는 실험이다. 이 실험의 결과에서 알 수 있듯이 Escherichia coli가 Safranin에 의해 염색되어 붉은색을 나타냄을 확인함으로써 negative bacteria인 것을 알 수 있으며 Lactobacillus casei가 Crystal violet의 보라색을 나타냄을 확인함으로써 positive bacteria인 것을 알 수 있다. 그램 염색은 세균의 염색성, 모양, 크기, 배열 등에 따라 판독하며 그 외 배양정도 에 따라 영향을 받을 수 있다.
Ⅶ. Reference
[1] Madigan, Martinko, Parker, Prentice Hall(9th), “Biology of Microorganism”
[2] Prescott, Harley, Klein, “Microbiology”, 5th edition, Life Science Publication Co.

키워드

Gram-Staining,   그램양성균,   그램음성균,   펩티도글리칸