그람 스테이닝(Gram Staining)

소개글

그람 스테이닝(Gram Staining)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

Gram Stainig

1.서론 ················ p2
1-1 Gram Staing의 실험 목적과 원리
1-2 균이란
1-3 세균이란
1-4 동정이란

2.본론 ··············· p5
2-1 실험 재료
2-2 현미경 사용법 및 관련자료
2-3 실험방법


3.결론 ··············· p9
3-1 실험 결과 및 고찰
3-2 그 외 Gram Staining의 관한 자료
3-3 참고문헌

본문내용

애초에 염색이 되지 않아서이다. 마지막막에 하는 safranin염색은 그람 음성만 염색되는게 아니고 그람 양성 과 음성 모두 염색이 됩니다. 그러니까 처음에 어느 한 양성균이 염색이 안 됐다면 음성 과 똑같이 보인다. safranin 염색을 카운터염색이라 하는데 저걸 왜하냐면 그람 음성 도 보려고 염색하는 것이다. 하지 않으면 그람 음성은 아예 안보이고 양성만 보일 것이 다. 크리스탈 바이올렛과 색깔이 다르므로 구별할 수 있다.
ㅡㅡ>미생물 실험실에서 처음 해보는 균실험이라서 그런지 많이 떨렸지만 이론을 배우고 실제로 한천 배지에 배양된 균을 멸균된 백금이로 떠서 염색을 하고 건조를 시키고 하면서 실험에 대한 재미도 느꼈다. 그리고 배운 것을 내가 조사해서 그 원리에 대해서 알아보고 실험에서 알지 못한 자료를 찾으면서 성취감을 느꼈다.
3-2 그 외 Gram Staining의 관한 자료
1.Gram 염색
그람염색은 세균학에서 가장 많이 사용되고 있는 염색법이며 세균의 분류(1.연쇄구균 2.포도구균 3.쌍구군 4. 4연구균 5. 8연구균 6.간균 7.비브리오 8.나선균 9.편모 10.아포 11.협막)에 이용된다. 그람양성균과 그람음성균을 구별하는 염색이기 때문에 Differential stain 이라고도 한다. 1884년 C. Gram 에 의해 처음 창안된 염색법으로 두 가지의 세균으로 분류된다. 이후 여러 가지 방법이 제안되었으며 Hucker 의 방법과 Burke의 방법이 일반적으로 사용된다. 여기에서는 전자를 위주로 설명하였다. 그람 염색 결과 자주색으로 염색되는 세균은 그람양성이며 분홍색으로 염색되는 세균은 그람음성이다. 양성과 음성은 전기적 성질과는 무관하며 단순히 형태학적 차이를 나타내는 용어이다. 그람양성균과 음성균이 서로 다르게 염색되는 것은 근본적으로 세포벽 구조가 다르기 때문이다. 세균의 세포벽은 크기와 형태를 유지하게 하며 또한 삼투압에 의한 세포 파열을 방지하는 역할을 한다. 세포벽에는 펩티도글리칸(peptidoglycan) 이라고 하는 물질이 있기 때문에 아주 단단하다. 그람양성균의 세포벽은 여러 층의 펩티도글리칸층이 두껍게 감싸고 있는데 세포벽의 약 80-90%가 펩티도글리칸이다. 반면, 그람음성균의 세포벽은 펩티도글리칸층이 한 겹으로 매우 얇으며, 이층 외부에는 인지질, 리포폴리사카라이드, 리포프로테인 등으로 구성된 외막(outer membrane)이 감싸고 있는 형태로 세포벽이 이루어져있다. 세포벽의 10-20%만이 펩티도글리칸이다. 이러한 세포벽 구조의 차이로 인한 그람 염색의 차이는 세균을 분류하는 가장 기본적인 기준이 되었다.
2.미생물에서 Gram Positive와 Negative 균의 차이점
미생물의 세포벽은 진핵세포의 세포벽과 화학적으로 다르며, eubacteria와 archae
bacteria의 세포벽도 서로 다르다. Eubacteria의 경우 세포벽형성에 있어서 peptidoglycan분자를 구성 물질로 이용하는데, 이의 구성 체제에 따라서도 크게 두 가지로 분류할 수 있다. 한 그룹의 경우 peptidoglycan층이 두껍고 teichoic acid라는 다당류가 포함되어 있다. 다른 경우는 peptidoglycan은 얇지만 외막에 의하여 싸여있다. 이러한 세포벽의 구성상의 차이로 인해 두 그룹은 염색에 다른 반응을 보인다. 즉, 두꺼운 세포벽을 가진 세균은 Gram staining시에 사용하는 crystal violet을 흡수하여 보유하는 성질을 가지고 있다. 이와 같은 세균을 Gram positive라고 부르며 보라색을 띈다. 이와는 달리 얇은 세포벽을 가진 세균은 gram staining시에 crystal violet을 보유하지 못하기 때문에 Gram negative라고 하며, 붉은색을 띈다.
이러한 gram positive균과 gram negative균의 세포벽 구조의 차이는 실제적으로 세균을 다루는데 있어서 중요하다. 두꺼운 peptidoglycan층을 가지는 positive균은 물리적인 힘에 대해서는 좀 더 잘 견디나, 가수분해효소인 lysozyme에 의해서는 외부가 지질성 막으로 싸여 있는 negative균의 peptidoglycan보다 더 쉽게 분해된다. 그리고 positive균은 페니실린에 대하여 고도의 감수성을 나타낸다. 왜냐하면 페니실린의 존재 하에서 분열하는 세포의 peptidoglycan 합성효소가 저해를 받아 세포벽이 형성되지 못하기 때문이다. 이렇게 세포벽이 형성되지 못하면 외부에서 유입되는 물에 대항할 수가 없어 세포막이 파괴되고 세균이 파괴된다. 그에 반해, negative균은 페니실린에 대하여 감수성을 나타내지 않는다.
※ gram staining 방법 : crystal violet으로 염색 -> iodine 용액으로 착색 ->alcohol로 탈색 -> safraninO로 염색
; positive균의 경우 염색을 한 뒤에 peptidoglycan 층이 두꺼워 탈색이 잘 되지 않아 보라색을 띄고, negative균의 경우 peptidoglycan 층이 단일층으로 되어 있으며 세포벽이 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide(LPS)로 이루어져 있어 crystal violet의 보라색이 빠지고 그 후 염색하게 된 safraninO의 붉은색으로 염색이 됨.
3-3 참고문헌
http://www.reportworld.co.kr/report/data/view.html?no=169744
http://www.reportworld.co.kr/report/data/view.html?no=67127
http://www.microid.co.kr/business/identification.htm
http://kin.naver.com/open100/entry.php?eid=YzCs1AAdaxlKGKU9ShscwhoHwnuTWvJo
http://www.reportworld.co.kr/report/data/view.html?no=169744
http://www.reportworld.co.kr/report/data/view.html?no=167601
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