재조합 단백질의 발현과 분리 정제 및 SDS PAGE를 이용한 확인

소개글

재조합 단백질의 발현과 분리 정제 및 SDS PAGE를 이용한 확인에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1실험목적

2원리

3실험방법

4결과 분석 및 토론

본문내용

in이 resin에 binding 되었기 때문에, 밑에 있는 resin 이 아닌 상등액에서는 검출되지 않은 것이다. 또한 이를 washing 한 후의 상등액에서는 이미 resin에 binding 되어있는 protein을 제외한 나머지 protein 이 모두 씻겨져 나간 상태이므로, 아무런 band를 볼 수 가 없다. 그리고 마지막의 band는 elution으로 resin에 binding 했던 protein을 검출하여 측정한 경우이므로 우리가 원했던 앞에서 진한 band 한 곳만이 검출 되었다. at result, 우리가 원하는 단백질은 30~45kDa 사이의 값이라고 볼 수 있다.
비교적 실험결과가 clear 한 것을 볼 수 있다. band의 굵기 뿐만 아니라, 위치(생겨야 할 곳, 생기지 말아야 할 곳) 등이 이론적인 결과와 일치하는 것을 알 수 있다.
10주차
왼쪽이 열을 가한 것이고 오른쪽이 열을 가하지 않은 sample이다. 여기서 보면, 열을 가하지 않은 sample은 밴드가 무수히 많이 보이는 반면, 열을 가한 후의 sample은 band가 거의 없는 것을 관찰 할 수 있다. 이는 -synuclein 열안정성의 특징을 갖는 것을 보여준다. 다른 protein들은 열에 약해 변성되지만, -synuclein은 변성되지 않아서 SDS-PAGE gel에서 band를 볼 수 있다. 이 외에도 band가 여러개 관찰 되 있는 것을 볼 수 있는데, 이는 -synuclein외에 또다른 변성되지 않은 protein이 있는 것으로 보인다.
참고문헌
세포생물학 / 정문각
cell biology / polard 外

키워드

재조합,   단백질,   발현,   sds page,   iptg,   재조합 단백질,   단백질의 발현,   발현과 분리 정제