미생물배양

본문내용

축적되기 시작하는 시기.
사멸기
(death phase)
신생된 박테리아의 수보다 사멸한 수가 증가하여 생균수가 점점 감소하는 시기(, )
미생물이 생존하기 위한 최소에너지를 유지에너지(maintenance
energy)라 한다. 유지에너지가 기질의 농도 보다 큰 경우 외호흡
(external respiration)을 할 수없어 세포는 증식이 불가함으로 세포내
의 저장물을 소비 즉 내호흡(internal respiration)을 한다. 내호흡
(internal respiration)이 오래 지속되면 세포는 자기분해(autolysis)를 함
결 론
미생물과 기질의 종류에 따라 유도기, 대수증식기, 정지기, 사멸기는
상이함
실제 환경조건
(온도, pH, 용존산소 농도, 등)
미생물의 생장곡선
3. 실험 도구
LB medium, E.coli BL21균주, 삼각 플라스크, clean bench, 알코올램프 등
4. 실험방법
1. 멸균한 배지(48ml)를 clean bench에서 이미 키워진 E.coli BL21 균주(8ml)를 접종한다.
2. 접종한 균주는 37℃ shaking incubator에서 200rpm으로 shaking 해주면서 키운다.
3. 접종시간을 0분으로 했을때부터 시작하여 20min 간격으로 플라스크의 샘플을 1ml씩 1.5ml tube에 취한다.
4. 취한 샘플은 10배 희석하여 600파장에서 OD(흡광도)를 재고 수치를 기록한다.
(증류수 2700㎕, 샘플 300㎕)
5. 세포 OD값이 올라가다가 감소할때까지 반복하여 진행한다.
5. 실험 결과
시간
OD(600nm)
0
0
20
0.083
40
0.128
60
0.183
80
0.200
100
0.227
120
0.230
140
0.234
160
0.182
180
0.174
6. 고찰
Clean bench 사용에 주의점은 사용 20분 전 UV lamp를 켜서 멸균시킨다. 다음 사용 시에는 UV
램프는 반드시 끄고 형광등을 켜고 사용하여야 하며 팬을 켜주어야 한다. 다음 알코올로 clean
bench 안을 닦아주고 실험 조작시 알코올램프에 항상 불을 달아 놓아야 한다.
그리고 균주 접종은 알코올램프가 놓여져 있는 곳에서 직경 30cm 이내에서 진행되어야 하며 균
주, 배지 등 모든 뚜껑을 열거나 닫을 때에는 알코올램프의 외염으로 멸균시켜주고 사용하여야
한다. 균주 배양 시 모든 오염가능성은 배제하면서 조심스럽게 작업해야 한다.

키워드

박테리아 균주의 생장곡선,   생장곡선(growth curve),   미생물의 세대시간