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목차

Ⅰ. 개요

Ⅱ. 배지(배양기, 배양액)의 개념

Ⅲ. 배지(배양기, 배양액)의 성분
1. 물
2. 불활성 지지물
3. 무기영양소
4. 유기영양소
1) 탄소원
2) 생장 조절물질
3) 비타민
4) 아미노산
5) Polyamine
5. 천연추출물
6. 기타물질
1) 활성탄
2) 플로로 글루시놀

Ⅳ. 배지(배양기, 배양액)의 종류
1. 재료에 따른 분류
1) 천연배지
2) 합성배지
3) 반합성배지
2. 사용형태에 의한 분류
1) 고체배지
2) 액체배지
3. 사용 목적에 따른 분류
1) 보통배지
2) 특수배지

Ⅴ. 배지(배양기, 배양액)의 제조법
1. 탄소원
2. 질소원
3. 무기염류
4. 생장소
5. 제조

Ⅵ. 배지(배양기, 배양액)의 사용법
1. 배양배지의 제조
2. 다량원소
1) N
2) P
3) K
4) Ca
5) Mg
6) S
7) C
3. 미량원소

참고문헌

본문내용

염은 P, Na, K, Mg, S, Fe, Cl이며, Ca, Mn, Zn, Cu 등을 필요로 하는 것도 있다. 그 외의 무기염류는 미량이 요구되는데, 감자, 육즙, Yeast extract, peptone 등의 천연의 배지를 사용하는 경우에는 그 속에 필요한 량이 들어 있어서 별도로 첨가하지 않아도 된다.
4. 생장소
대부분의 미생물은 비타민 등 생장소를 합성하지만 일부는 체내에서 합성하지 못해 배지에 미량의 생장소를 첨가해 주어야 한다. 순수한 합성배지l에는 생장소를 첨가하지 않으면 많은 미생물이 생육 할 수 없다. 식물즙액, Yeast extract, 육즙 등에는 이들의 생장소가 함유되어 있으므로 별도로 첨가하지 않아도 된다.
5. 제조
미생물의 생육과 산물형성에 최적인 상태 형성이 목적이다. 세포 성분 분석으로 최소 배지를 만든다. 특정 생화학적 요구량을 분석하여 적절한 생육소를 공급한다. 에너지의 요구를 분석한다. 산소의 요구 유무, pH 조절, CO2 공급, 무기 무기염류의 침전 방지, 이온 strength, 빛 등의 조절이 필요하다. 최적의 유기물질 농도로 준비해 substrate 과다 시 생육억제를 방지한다.
① 증류수를 이용한다.
② formula 순서대로 넣는다. 순서가 바뀌면 녹지 않는 경우가 있으므로 전 물질이 다 녹으면 다음 물질을 넣는다.
ex) buffer soln, major source, trace element, vitamin(autoclave를 하고 넣는다.)
③ filtration으로 녹지 않고 남은 물질을 제거한다.
④ pH 조절
⑤ agar를 넣고 녹인다.
⑥ Autoclave
Ⅵ. 배지(배양기, 배양액)의 사용법
미생물이나 동식물의 조직을 배양하기 위하여 배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하고, 다시 특수한 목적을 위한 물질을 넣어 혼합한 것으로서, 배양기(培養基)·배양액(培養液)이라고도 한다. 생물은 생존발육에 불가결한 물을 비롯하여 영양물질로서 다량요소·미량요소 등을 요구한다. 그 중 기체상으로 얻어지는 것을 제외하고는 모두 무기 또는 유기화합물로서 배지에 공급해 주어야 한다. 필요한 화합물은 독립영양종속영양 등 영양 형식에 따라 여러 가지이다. 보통 영양원을 탄소원질소원무기염류발육인자(비타민류) 등으로 나누어서 생각한다. 특히 발육인자와 관련하여 생물체에서 추출한 비교적 복잡한 조성을 가진 것을 주체로 한 경우를 천연배지(天然培地)라고 한다.
세균배양에는 육즙·혈청 등이, 곰팡이배양에는 맥아추출물 등이 흔히 사용된다. 이에 대하여 무기염류만 또는 구조가 확실한 탄소원·질소원을 가한 조성이 명확한 경우를 합성배지(合成培地)라고 한다. 대량 배양에는 액체배지가 적당하고, 주(株)의 보존이나 분리에는 한천·젤라틴 등을 가한 고형배지를 사용한다. 많은 종류의 세균을 포함하는 재료로부터 목적균을 추출하기 위한 배지를 선택배지라고 한다. 배지는 완전히 멸균한 후에 목적균을 심지 않으면 잡균이 증식될 염려가 있고, 배지를 보존하기 위해서도 반드시 멸균이 필요하다.
1. 배양배지의 제조
좋은 미생물 성장을 위해서 요구 영양분을 균형 있게 공급한다.
○ 적당량: 과량의 경우 성장이 저해되거나 독소 분비
○ 고농도 유기물질: acetic acid, 고농도 무기물질: 자체 독성
○ 환경의 유지: pH의 저하 및 산소 결핍 방지
2. 다량원소
1) N
아미노산, 단백질, 핵산등 중요한 생체 성분을 구성하는 원소이다. 질소를 포함하는 무기염에는 암모니움성(NH4+)과 질산성(NO3-)이 있고 배지내의 암모니움성과 질산성질소의 비율은 부정배분화나 2차 대사산물 생산 등에 영향을 미친다. 암모니움성 질소원으로는 (NH4)2SO4, NH4H2PO4를 주로 사용하며, 질산성질소원으로서는 KNO3, NaNO3, Ca(NO3)2등을 사용한다. 또 NH4NO3처럼 분자내에 두 가지 질소성를 포함하고 있는 염도 배지에 사용한다.
2) P
핵산, 에너지대사, 중간체, 보효소, 지질 등에 포함하는데 KH2PO4, NaH2PO4, NH4H2PO4등의 염의 형태로 참가한다.
3) K
세포내의 원형질 구조의 유지나 pH, 삼투압 조정 등의 작용을 하며 기관분화에 칼륨이 관계한다는 보고도 있다. K급원으로 KNO3, KCl을 첨가한다.
4) Ca
세포벽이나 막 등의 구조의 유지, 효소의 활성제와 세포 정보 운반물질로서 작용하고 배지에는 CaCl2, Ca(NO3)2로 첨가한다.
5) Mg
세포구조의 유지, 효소의 활성제 등의 작용을 하지만 녹색세포에서는 엽록소의 구성성분이 되며 MgSO4, MgCl2로써 사용한다.
6) S
세포에 도입된후 환원되어 메티오닌이나 시스테인이 되고 다시 황화압물에 유입된다. 황산염의 형태로 배지에 첨가한다.
7) C
배양세포는 일반적으로 광합성능력이 없기 때문에 세포가 생육하여 대사를 하는데 필요한 탄소골격이나 에너지를 생산하기 위해 당을 탄소원소로 배지에 첨가한다. 설탕을 가장 많이 사용하며 배지에는 10～30g/ℓ첨가한다.
3. 미량원소
미량 무기요소는 세포성분의 일부를 구성하거나 효소의 활성화 작용에 관계하는 것이 많으나 상세한 작용기작에 대해서는 잘 알려져 있지 않다.
○ Fe - FeSO4를 Na-EDTA로 킬레이트화 한 것, 혹은 시판하고 있는 킬레이트철
○ Mn - MnSO4
○ Zn - ZnSO4
○ Cu - CuSO4 시코닌생산이나 아스코르빈산 염화효소등의 효소활성을 촉진시킨다.
○ B - H3BO3
○ Mo - Na2MoO4
○ I - KI
○ Co - CoCl2
○ Ni - NiCl2 우레아제의 효소활성에 영향을 준다.
○ Al - AlCi3
○ 비타민류 - Thiamin, Pyridoxine, Nicotinic acid
○ 유기물성분 - 미오이노시톨(myo-inositol)
참고문헌
◇ 김종협(1993), 미생물학 실험서, 대광문화사
◇ 김진희 외 3명, 세포 배양 노트, 월드 사이언스
◇ 김주영 외 3명, 최신 미생물학 실험, 형설출판사
◇ 노완섭 외 5명, 식품 미생물학, 지구문화사
◇ 박철희·최석순, 환경미생물 실험, 신광문화사
◇ 오계현 외 2명(2000), 미생물학 실험, 신광문화사

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