Genomic DNA의 추출 및 정제

목차

1. Title

2. Objectives

3. Materials
① Tool
② Agents

5. Methods & Procedures

6. Results & Discussion

본문내용

서 2분을 Centrifuge 한다.
⑮ Spin Column의 아래 Tube는 버리고 Column을 1.5㎖ Tube에 옮겨준 후 Alcohol을 상온에서 증발시켜준다.
Column에 Elution buffer 100㎕을 넣고 56℃ Incubator에서 5분간 넣어둔다.
14000rpm에서 1분을 Centrifuge하고 Column을 제거하면 소 혈액의 Genome DNA를 얻을 수 있다.
추출한 DNA는 냉동 보관하여 사용한다.
Elution buffer 100㎕에 용해된 DNA 5㎕와 dH2O 995㎕를 혼합하여 200X 희석한다.
UV-Spectrophotometer를 사용하여 260nm와 280nm에서 O.D값을 측정하고 기록한다.
6. Results & Discussion
: UV-Spectrophotometer를 이용하여 추출된 DNA의 농도를 측정하시오.
< 소 혈액에서 추출한 Genomic DNA의 O.D값 측정 결과 >
260nm
280nm
농도
순도
1
0.448
0.224
4.48
2.0
2
0.443
0.259
4.43
1.7
3
0.378
0.211
3.78
1.8
4
0.435
0.225
4.35
1.9
※ DNA 농도
260nm 측정치 × 희석비율(200배) × 50 ÷ 1000 = 농도 μg/μl
※ DNA 순도
260nm ÷ 280nm = 순도
※ 순도측정 값이 1.8±0.2 일 때 순도가 가장 좋다. 1.8 미만인 경우에는 Protein이나 정제시 쓰이는 Phenol의 오염되었을 확률이 높으며, 2.0 이상인 경우에는 RNA가 과량 함유되어 있을 확률이 높다.

키워드

DNA,   Genomic DNA,   추출,   정제,   Genomic DNA의 추출 및 정제