생화학실험 DNA 정량 온도에 따른 변화

소개글

생화학실험 DNA 정량 온도에 따른 변화에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1.실험제목

2.실험목적

3.실험이론

4.실험기구&시약

5.실험방법

본문내용

ytosine사이에는 수소결합 3개, Adenine-Thymine사이에는 수소결합 2개로 G-C의 비율에 따라 온도를 변화시켜주어야 한다.
c. DNA합성
약 72℃로 재 가열 시킨다.
위의 a,b,c과정이 여러번 반복되면서 증폭된다.
* 목표 연속부분의 염기순서는 몰라도 된다. 단지 양 옆의 염기순서만 관여한다.
* 높은 온도에서의 혼성체화는 엄격하여야 하기 때문에 특이성이 높다.
* PCR은 매우 민감하다.
3. 실험기구 & 시약
① TE(tris EDTA) buffer
<↑EDTA>
DNA의 경우 pH8.0 / RNA의 경우 pH7.5 / DNA+RNA 경우 pH8.0
pH 8.0 : 100mM tris-cl (pH8.0) + 10mM EDTA(pH8.0)
Tris-cl(pH8.0) : trizabase 를 증류수에 넣고 pH8.0까지 HCl로 조절한다.
② DNA sample
③ Spectrophotometer
④ cuvetter
4. 실험방법
① spectrophotometer기기를 사용 30분전에 미리 켜놓는다.
② E.P tube에 495 TE buffer를 넣고 DNA원액 5를 넣어 mix시킨다.
(1:100dilution과정 )
③ cuvette에 TE buffer 500를 넣고 setref키를 눌러 측정한다. (select키를 눌러서 230, 260, 280nm의 spec이 0인지 확인한다.)
④ cuvette에 3차 증류수로 washing한다.
⑤ cuvette에 준비해 놓은 100배 dilution sample을 넣고 sample,키를 눌러서 260nm와 280nm에서 측정한다.)

키워드

DNA정량,   분광광도계,   생화학실험,   DNA,   PCR