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Date
2010년 10월 7일 ~ 14일
Subject
Plasmid DNA 분리와 젤 전기영동, 그리고 DNA 정량
Purpose & Introduce
E.coli로부터 plasmid DNA를 분리하는 방법을 익히고, 전기영동의 원리에 대해 알아보고 실험해보며, DNA정량 하는 법을 배운다.
Plasmid DN
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Plasmid DNA 분리 (이온 교환 크로마토 그래피)
형질전환 된 E.Coli cell로부터 plasmid DNA를 재분리 하고자 하는 실험으로서, plasmid preparation method에는 alkali lysis법, boiling법, 효소 분해법 등이 있다.
형질 전환 균주가 갖고 있는 플라스미드에 존재
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Plasmid DNA의 크기를 확인 한다.
5. 참고 문헌
- https://cafe.naver.com/biofactacademy/76 (바이오팩트 공식 학술카페) - Plasmid prep
- [네이버 지식백과] 플라스미드 [Plasmid] (분자·세포생물학백과)
- 김명원 외 9명, 생명과학 개념과 현상의 이해, PEARSON, 186pag
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k)하게 진행된다. Plasmid에서 코드되는 RNAII molecule이 primer로 작용, ori 에 binding하여 DNA polymerase I과 함께 replication이 일어난다. 이때 RNAII에 complementary한 RNAI이라는 RNA molecule이 RNAII와 hydrogen bond로 결합하면 RNAII가 oriV에 binding하지 못하여 replication
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분리하여 수용액 층과 유기용매 층을 분리한다.
Phenol은 pH8.0 인 Tris-Cl 용액으로 평형시킨 후 사용하여야 한다. 그것은 phenol의 pH가 8.0이면 유기용매 층과 수용액 층 사이에 DNA가 걸려 채취하기 곤란한 경우를 방지 해 주기 때문이다.
6) 수용액
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분리향상」, 분석과학, Vol.19, No.6, 김희준외 6명 공저, 한국분석과학회, 2006, p529-532.
-「최신 생화학」, 김을상, 신광문화사, p135-138.
-「다양한 정제방법에 의한 전기영동용 한처유래 아가로즈의 제조 및 DNA 분리특성」, 한국식 품과학회지 Vol.31
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분리 또는 합성하여 유전자를 재조합하거나 재조합된 새로운 유전자를 세균 등에 도입하여 특정한 생물활성물질을 다량으로 저렴하게 생산하게 할 수 있어서 이미 선진국들은 이의 실용화를 위하여 크게 투자하고 있다. 유전공학의 발전은
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