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gel이 깨끗하지 못해 중간중간 불순물들에 의해 검게 보이는 것도 깨끗한 사진을 얻지 못했던 이유중 하나인 것 같고, Agarose가 굳기 전 DNA 이중나선의 사이에 들어가 나중에 gel에 자외선을 쐬면 형광이 나와 눈에 보이도록 해주는 역할을 하는
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전기영동 과정에서 이동하기가 힘들다.
5)PCR 과정에서 DNA가닥을 열로 분리하는 이유는 무엇인가?
-DNA가 수소결합으로 되어있는데 수소결합은 약하기 때문에 굳이 Helicase
효소를 사용하지 않아도 열을 이용하여 끊을 수 있다.
6) 염기서열
42F- (
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, 이는 실험 과정 중에 오염이 있어 DNA가 잘렸거나 PCR 사용시 Primer가 제대로 작용하지 않았을 가능성이 있다. 하지만 확실하게 단정지을 수 없다. 원래는 전기영동실험시 band가 보이게 하기 위하여 형광물질을 첨가하는데, 이 형광물질은 발암
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c DNA는 긴 염기가 그대로 있기 때문에 하나의 긴 띠 모양으로 나타나는 반면, PCR은 몇 개의 선택적 부위만을 증폭했기 때문에 끊어진 몇 개의 띠가 나타난다.
-고찰:
1번과 6번 칸이 각각 슈퍼 포플러의 Genomic DNA와 PCR의 전기영동 결과이다. 둘
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는 4개의 ds DNA가 있다. 30 cycle을 반복 후 개의 ds DNA가 존재하게 된다. PCR을 통해서 DNA를 증폭시켜서 많은 DNA를 얻어서 전기영동에 로딩하여 눈으로 확인할 수 있다. PCR은 온도조절이 정밀한 PCR 기계에서 수행하는데, 이 기계는 여러 사이클을
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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ote인지, homozygote인지를 구별 할 수 있었다.
실험이 성공적으로 이루어져 깔끔한 상태의 결과를 확인할 수 있었고, 어떤 것이 자식 오염주인지 전기영동 결과를 통해 알 수 있었다. 한 개의 종자(4번)만이 대립되는 두 allele을 갖지 못하여, 1개의
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전기영동을 이용하여 단백질과 DNA의 크기를 측정하는 네 번째 실험에서 α-synuclein의 크기는 38.619kd, LDH의 크기는 22.039kd였고 DNA중 하나는 초나선구조, 하나는 선형구조를 갖는다.
먼저 단백질은 SDS-PAGE를 이용하여 크기를 구했는데 SDS는 계면
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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