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RT(reverse transcriptase) PCR이란?
RT-PCR이란 P.Seeburg(1986)에 의해 RNA를 찾고 분석하는데 도입된 방법으로 mRNA(messenger RNA)로부터 reverse transcription 과정을 통해 얻어진 cDNA(complementary DNA)를 PCR로 증폭하는 방법이다. 이러한 방법은 RNA 검사의 sensitivity를
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transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)과 형광물질을 사용하여 DNA를 증폭시키면서 증폭산물을 동시에 검출하는 실시간 중합효소 연쇄 반응 등이 있다.
PCR 증폭효율에 영향요인
① 각 단계의 반응온도와 시간
② cycle 수
③ 반응액 조성(주형 D
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변성(Denaturation)
2. Primer의 결합(Annealing)
3. DNA의 합성(Polymerization)
RT-PCR (Reverse transcription PCR)
Real time PCR
Hybridization
SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism)
ISPCR (In Situ Polymerase Chain Reaction)
DDRT-PCR (Differential Display Reverse Transcri
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PCR을 응용한 새로운 실험방법이 매회 거의 빠짐없이 발표되고 있다. 많이 사용되는 방법 중에는 RT-PCR (reverse transcriptase PCR), SSCP (single strand conformation polymorphism), RACE (rapid amplification of cDNA ends), ISPCR (in situ PCR), DDRT-PCR (differential display reverse transc
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transcriptase)는 DNA RNA의 과정을 역행하는 효소, 즉 RNA DNA 과정에 관여한다. RT-PCR은 이 효소를 이용하여 합성된 cDNA (mRNA에서 합성되었으므로 intron 부분을 가지고 있지 않고 coding되는 exon만을 가지는)를 PCR를 이용해 증폭하는 것이다.
3-4. 생체 내
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