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ry시킨다.
ⅹ) Pellet을 TE(pH 8.0) with RNase(final 20μg/ml) 50μl에 녹인 후 37℃에서 30분간 incubation한 후 -20℃에 보관한다.
☞ 분리된 DNA의 정량
ⅰ) UV spectrophotometer를 10분 정도 미리 켜두어 발생되는 자외선을 안정화 시킨다.
ⅱ) 실험에서 얻은 DNA 용액
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5ml 멸균된 LB medium에서 overnight 한다(37℃에서 최소한 mid-log phase 까지 배양한다).
2. 1.5ml의 종배양액을 1.5ml microcentrifuge tube에 옮기고 원심분리하여 cells을 모은다 (pellet). 상등액을 제거한다.
3. 200㎍ lysozyme이 든 STET soln. 300㎕에 pellet을 녹인다.
4.
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Mini-Plasmid Preparation"
2. 위키백과 “에틸렌다이아민테트라아세트산“
3. QIAGEN "QIAprep Spin Miniprep Kit"
4. 네이버 지식사전 “흡광도, hyperchromic effect" Introduction
-solution 1,2,3
-EDTA
-miniprep.
-흡광도(absorbance , optical density)
-감색효과 (hyperchromic effe
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Abstract
이번 실험은 유전자 재조합에 가장 빈번하게 사용되는 E.coli의 plasmid DNA를 추출하는 기술로서 alkaline lysis 를 이용하여 plasmid DNA를 추출하고, 이를 제한효소로 분석하여 검증하는 것이었다. Alkaline lysis를 이용한 Mini-scale preparation of plasmid
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러 개의 plasmid가 관찰되는 것을 알 수 있다. 크기가 8000kb이지만 그 위쪽과 아래쪽에도 희미하게 띠가 관찰된다. 이는 실험 과정 중 세포벽과 세포막을 깨고 녹이면서 plasmid DNA가 조각났기 때문인 것으로 추측되고 위쪽 띠는 8000kb보다 큰 단편,
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