목차
I. 실험 목표
II. Introduction - 실험 배경
1. ELISA
2. 4PL (4-parameter logistic curve)
III. Materials & Methods
IV. Results
V. Discussion
VI. References
II. Introduction - 실험 배경
1. ELISA
2. 4PL (4-parameter logistic curve)
III. Materials & Methods
IV. Results
V. Discussion
VI. References
본문내용
I. 실험 목표
Indirect ELISA를 통해 antigen에 specific하게 binding 하는 antibody를 관찰하고, antibody의 농도에 따라 달라지는 absorbance 값의 의미를 분석 및 이해한다.
II. Introduction - 실험 배경
1. ELISA
ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)는 antigen과 antibody 사이의 interaction을 통해 이들의 정량 혹은 정성적 분석을 하는 기법이다. 이때 사용되는 antibody에는 enzyme이 conjugation 되어 있는데, 해당 enzyme과 특정 substrate가 binding 할 시 발색 반응, 형광 반응, 발광 반응 등을 일으킨다. 이와 같은 반응이 일어난 정도를 측정함으로써 분석을 진행한다. ELISA에는 Direct ELISA, indirect ELISA, sandwich ELISA 등 다양한 방식이 존재한다.
① Direct ELISA
Direct ELISA는 primary antibody만을 통해 antigen을 직접 검출하는 방식이다. 우선 well에 antigen을 coating 하여 바닥에 고정한 뒤, 해당 antigen에 대한 antibody를 투여하여 coating 된 antigen과 결합하도록 한다. 이후 antigen과 결합하지 않은 antibody를 wash 하고, antibody에 conjugation 된 enzyme과 반응하는 substrate를 넣어 반응을 일으킨다. 해당 반응이 일어나는 정도를 통해 antigen 혹은 antibody의 양을 측정할 수 있다. 이 과정에서 한 개의 primary antibody가 추가적인 antibody의 사용 없이 직접 antigen을 detection 하기 때문에 direct ELISA라고 부른다.
Indirect ELISA를 통해 antigen에 specific하게 binding 하는 antibody를 관찰하고, antibody의 농도에 따라 달라지는 absorbance 값의 의미를 분석 및 이해한다.
II. Introduction - 실험 배경
1. ELISA
ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)는 antigen과 antibody 사이의 interaction을 통해 이들의 정량 혹은 정성적 분석을 하는 기법이다. 이때 사용되는 antibody에는 enzyme이 conjugation 되어 있는데, 해당 enzyme과 특정 substrate가 binding 할 시 발색 반응, 형광 반응, 발광 반응 등을 일으킨다. 이와 같은 반응이 일어난 정도를 측정함으로써 분석을 진행한다. ELISA에는 Direct ELISA, indirect ELISA, sandwich ELISA 등 다양한 방식이 존재한다.
① Direct ELISA
Direct ELISA는 primary antibody만을 통해 antigen을 직접 검출하는 방식이다. 우선 well에 antigen을 coating 하여 바닥에 고정한 뒤, 해당 antigen에 대한 antibody를 투여하여 coating 된 antigen과 결합하도록 한다. 이후 antigen과 결합하지 않은 antibody를 wash 하고, antibody에 conjugation 된 enzyme과 반응하는 substrate를 넣어 반응을 일으킨다. 해당 반응이 일어나는 정도를 통해 antigen 혹은 antibody의 양을 측정할 수 있다. 이 과정에서 한 개의 primary antibody가 추가적인 antibody의 사용 없이 직접 antigen을 detection 하기 때문에 direct ELISA라고 부른다.
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