PCR실험결과와 고찰레포트

소개글

PCR실험결과와 고찰레포트에 대한 보고서 자료입니다.

목차

Ⅰ. INTRODUCTION
Ⅱ. MATERIAL
Ⅲ. METHODE
Ⅳ. RESULT
Methods;
Material;
Result;
※ Tm 값
※ Mg2+ 농도가 미치는 영향
※ Hot-start
Ⅵ. REFERENCE

본문내용

이다.
※ Hot-start
Taq DNA polymerase가 사용된 후부터는 거의 목적하는 DNA가 agarose gel상에서 단일 band로 나타날 만큼 증폭이 특이적으로 이루어지게 되었다. 이것은 annealing과 DNA합성의 온도를 높이기 때문에 가능해진 일이다. 그러나 최초의 변성과정에서 온도가 실온으로부터 단계적으로 상승할 때 비특이적 반응이 일어나는 경우가 있다. 이것은 부분적으로 single strand로 된 주형DNA에 primer가 낮은 온도에서 비특이적으로 annealing하고 그 결과 DNA합성반응이 진행되어 새로운 DNA주형이 생기기 때문이라 생각되고 있다. 목적하는 주형 DNA가 미량 밖에 존재하지 않는 경우 이 반응은 특이적 증폭을 경쟁적으로 저해하는 인자가 된다. 이 문제를 해결하기 위해서는 Taq DNA polymerase가 70℃ 이상에서 반응하도록 하여야 하며, 그 때문에 Taq DNA polymerase,Mg2+, primer를 온도가 상승한 후에 첨가하여 반응을 시작하는 방법이 고안되었다. 이러한 방법을 Hot start PCR이라고 부른다. 이 방법을 사용하면 비특이적 반응이 적어지며 더우기 primer-dimer의 생성도 억제될 수 있다.
Ⅵ. REFERENCE
Life science & Biology/ 히로유끼 무까이/ advanced biomedical/ pp. 42∼45
http://www.yumc.yonsei.ac.kr/medicine/bioche/biokormanualindex.html
http://ee.uos.ac.kr/~dhlee/LDH12.htm

키워드

PCR,   DNA,   RNA,   DNA합성,   Tm,   생명공학