목차
1. 레지오넬라(Legionella)란?
2. Legionella 균의 특성
3. 냉각탑수에서의 균 분리
4. 레지오넬라의 검출법
2. Legionella 균의 특성
3. 냉각탑수에서의 균 분리
4. 레지오넬라의 검출법
본문내용
전면에 충분히 흡수할 때까지 도말 하고, 36℃에서 배양한다.
매일 관찰을 하고, 3일째 부터 출현하는 푸른색을 띠는 습윤 집락을 계수한 후, 수개의 집락을 B-CYEα 한천배지로 재분리 한다. 이들 순수배양 균주는 그람염색을 하면서, L-시스틴을 함유하지 않은 CYE한천 기초배지 또는, 혈액 한천배지에 도포하여, 36℃에서 5 ∼ 7일간 배양해, L-시스틴 요구성을 시험한다. 균체가 0.3 ∼ 0.9 × 2 ∼ 20 ㎛ 또는 그이상의 가늘고 긴 그람음성 간균으로, L-시스틴을 함유하지 않은 CYE한천기초배지나 혈액한천배지에는 발육하지 않는 균주를 레지오넬라균 속으로 한다. 균주의 동정은 면역혈청에 의한 슬라이드 응집 반응과, DNA-DNA 하이브리다이제이션에 따라 행한다.
<< 레지오넬라균 속의 검사 >>
공시수 1,000ml
↓
0.22㎛의 멸균 멤버레인 필터로 흡입여과
↓
이 필터를 멸균 증류수 5ml에 넣고, 볼텍스믹스로 1분 격렬하게 교반
↓
0.2M HCl-KCl 용액(pH 2.2)를 5ml 첨가하고, 다시 1분간 격렬하게 진탕 한다.
↓
수시로 교반하면서 실온에서 정확히 15 ∼ 20분간 작용 시킨다
↓
이것을 0.1ml씩, 5매의 WYOα 한천배지나 GVPCα 한천배지 등의 레지오넬라용 선택배지 전면에 충분히 흡수할 때까지 도말 한다
↓.
36℃에서 7일간 배양한다.
↓
푸른색을 띠는 습윤 집락을 계수한 후, 수개의 집락을 B-CYEα 한천배지에 이식하여 순수배양한다.
↓
그람 염색시험
↓
L-시스틴을 함유하지 않은 CYE한천 기초배지 또는, 혈액 한천배지에 도포하여, 36℃에서 5 ∼ 7일간 배양한다
↓
가늘고 긴 그람 음성 간균으로, L-시스틴을 함유한 B-CYEα 한천배지에서만 발육한 것을 레지오넬라균 속으로 한다.
↓
면역혈청에 의한 슬라이드 응집 반응, 또는 DNA-DNA 하이브리다이제이션에 의해 균 동정을 한다.
↓
B-CYEα 한천배지에 배양 후, 密栓하여 4℃에서 보존한다.
<<참고 : http://www.amn.co.kr/t/regionella.htm>>
http://www.jit21.com/product01_04.html
레지오넬라균(광조사 필림 밀착법(항ㅣ협 1998년도 판) 참조)
대조 : 폴리에틸렌필림
균액조제용액 : 1/500 NB 배지 (인산완충액으로 희석)
광조사조건 : 1,000 ~ 2,000 lx (백색형광등)
http://www.legionella.org/
매일 관찰을 하고, 3일째 부터 출현하는 푸른색을 띠는 습윤 집락을 계수한 후, 수개의 집락을 B-CYEα 한천배지로 재분리 한다. 이들 순수배양 균주는 그람염색을 하면서, L-시스틴을 함유하지 않은 CYE한천 기초배지 또는, 혈액 한천배지에 도포하여, 36℃에서 5 ∼ 7일간 배양해, L-시스틴 요구성을 시험한다. 균체가 0.3 ∼ 0.9 × 2 ∼ 20 ㎛ 또는 그이상의 가늘고 긴 그람음성 간균으로, L-시스틴을 함유하지 않은 CYE한천기초배지나 혈액한천배지에는 발육하지 않는 균주를 레지오넬라균 속으로 한다. 균주의 동정은 면역혈청에 의한 슬라이드 응집 반응과, DNA-DNA 하이브리다이제이션에 따라 행한다.
<< 레지오넬라균 속의 검사 >>
공시수 1,000ml
↓
0.22㎛의 멸균 멤버레인 필터로 흡입여과
↓
이 필터를 멸균 증류수 5ml에 넣고, 볼텍스믹스로 1분 격렬하게 교반
↓
0.2M HCl-KCl 용액(pH 2.2)를 5ml 첨가하고, 다시 1분간 격렬하게 진탕 한다.
↓
수시로 교반하면서 실온에서 정확히 15 ∼ 20분간 작용 시킨다
↓
이것을 0.1ml씩, 5매의 WYOα 한천배지나 GVPCα 한천배지 등의 레지오넬라용 선택배지 전면에 충분히 흡수할 때까지 도말 한다
↓.
36℃에서 7일간 배양한다.
↓
푸른색을 띠는 습윤 집락을 계수한 후, 수개의 집락을 B-CYEα 한천배지에 이식하여 순수배양한다.
↓
그람 염색시험
↓
L-시스틴을 함유하지 않은 CYE한천 기초배지 또는, 혈액 한천배지에 도포하여, 36℃에서 5 ∼ 7일간 배양한다
↓
가늘고 긴 그람 음성 간균으로, L-시스틴을 함유한 B-CYEα 한천배지에서만 발육한 것을 레지오넬라균 속으로 한다.
↓
면역혈청에 의한 슬라이드 응집 반응, 또는 DNA-DNA 하이브리다이제이션에 의해 균 동정을 한다.
↓
B-CYEα 한천배지에 배양 후, 密栓하여 4℃에서 보존한다.
<<참고 : http://www.amn.co.kr/t/regionella.htm>>
http://www.jit21.com/product01_04.html
레지오넬라균(광조사 필림 밀착법(항ㅣ협 1998년도 판) 참조)
대조 : 폴리에틸렌필림
균액조제용액 : 1/500 NB 배지 (인산완충액으로 희석)
광조사조건 : 1,000 ~ 2,000 lx (백색형광등)
http://www.legionella.org/