미생물염색법

목차

1. Introduction

2. Material & Methods

3. References

본문내용

음성세포에 대해서만 염색이 된다.(분홍색)
- 실험재료
① Culture (24 hr cultures) : Gram(+) - Bacillus subtilis, Gram(-) - E.coli
② 시약 : crystal violet, Gram;s iodine, 95% ethanol, sfranin
③ 기구 : 현미경, lens tissue, spoid, 배금이, alcohol lamp tissue(실험용), slide glass, 증류수기
- 실험방법
① 슬라이드 세척
② 균체도말
③ Air drying, heat fixation
④ Crystal violet(1분간 염색), 세척
⑤ Gram's iodine(1분간 고정), 세척
⑥ 95% ethanolㄹ 탈색시킴(알코올 방울방울 떨어뜨려 지나친 탈색을 방지), 세척
⑦ Safranin으로 염색(10~30초간), 세척 후 건조시켜 검경한다.
- 실험시 유의사항
① 그람 염색은 정확한 조작을 하여야 정확한 결과를 얻을 수 있다.
② 과도한 탈색을 하면 1차 염색약이 탈색되어 그람 양성균이 그람 음성균으로 판명 오류 발생
③ 각 조작 사이 사이에 반드시 물로 세척을 잘 하여 다음 시약의 작용이 정확하도록 함.
④ 24시간이 넘지 않은 신선한 배양균주를 사용할 것(특히 그람 양성균은 배양 시간이 경과함에 따라 1차 염색약의 착색능이 줄어들어 Gram variable이 되기도 한다.
3. References
- 박석기외, 최신미생물학, 신광문화사, 1995, pp. 69~72
- 미생물학 실험교재 편찬위원회, 미생물학 실험, 월드사이언스, 1995, p.74

키워드

미생물염색,   염색법,   그람염색,   편모염색