DNA의 농도 및 순도의 측정과 denaturation 및 renaturation

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험원리
1) 핵산
2) DNA
3) DNA 변성
4) DNA의 재생

4. 참고문헌

본문내용

분자 생물학에서 매우 종요한 도구로 쓰인다. 즉, 두 생물 사이의 유전적인 연관 관계, 특 정 RNA의 검출, 특정 생물체의 DNA 상에서 반복되는 염기 배열의 결정, 그리고 DNA 분자 에서 특정한 염기 배열을 찾아 내는 작업에 매우 유용하다. ① 두 가닥의 인산 사이의 정전기 반발력을 제거하기 위해 염의 농도가 충분히 높아 야 한 다. 보통 0.15에서 0.50M의 NaCl이 쓰인다. ② 외가닥 DNA 내에서 아무렇게나 형성되는 수소 결합을 막기 위해서 온도를 충분 히 올 려 주어야 한. 그러나 온도를 너무 높이 올려도 안 되는데, 온도가 너무 높 으면 두 가 닥 사이의 염기쌍의 형성도 방해 받기 때문이다. 최적 온도는 Tm온도 보다 20-25˚C정도 낮은 온도이다. Nitrocellulose로 만든 얇은 여과지가 상품화되어 있는데, 이 여과지는 단일 가닥 DNA와 잘 결합하지만, 이중나선 DNA나 RNA와는 쇱게 결합하지 않는다. 그래서 이 여과지는 잡종 DNA의 검출에 중요한 도구로 사용된다. DNA의 복귀는 아래와 같은 방법에 따라 여과지 위에서 일어나게 할 수 있다. 즉, 변성된 DNA를 여과지에 부착 한다. 이때 단일 가닥 DNA의 당-인산기는 여과지에 단단히 결합하지만, 염기는 자유 상태로 남아 있다. 그런 다음 더 이상의 단일 가닥 DNA가 여과지에 부착되는 것을 방지하는 시약과 변성된 방사성 DNA가 들어 있는 용액에 여과지를 넣는다. 그리고 일정 시간이 지난 수, 여과지를 씻어 주면 복귀가 일어난 여과지는 방사성을 띠게 된 다. 여과지를 이용한 잡종 검출의 가장 중요한 용도는 단일 가닥 DNA와 RNA 분자 사 이에 유사한 배열 순서가 있는지를 조사하는 것이다. 이것을 DNA-RNA 잡종이라고 하며, 특정한 DNA 분자로부터 전사된 RNA 분자를 검출하는 방법으로 쓰인다. 이 과정에서는 위에 기술한 바와 같이 DNA를 여과지에 부착시키고 방사능으로 표지된 RNA로 복귀시킨다.
4. 참고문헌
http://preview.britannica.co.kr/spotlights/nobel/list/B05d2742b.html
http://blog.naver.com/dorosy80.do?Redirect=Log&logNo=20009706841
http://dragon.seowon.ac.kr/~bioedu/appbio/gen01.htm
http://web.edunet4u.net/~hyb83/dna.htm

키워드

DNA농도,   DNA순도,   DNA변성,   DNA재생,   denaturation,   renaturation